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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教关于PCR产物电泳出现弥散条带
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yumo

新虫 (小有名气)

[交流] 请教关于PCR产物电泳出现弥散条带

将提取的DNA样本进行PCR后，发现条带弥散，MAKER正常，问题可能出在哪些方面？
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1楼 2009-02-13 17:12:48
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jqq1985

银虫 (正式写手)
★ ★
sxdxrhyy(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论！ 2-14 10:07
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sxdxrhyy(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论！ 2-14 10:07
sxdxrhyy(金币-4,VIP+0):对不起 系统出问题 评价出现重复！扣掉多余的币币！ 2-14 10:09
1,DNA片段断裂，2.DNA溶液里面有大量蛋白。
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2楼2009-02-13 18:11:09
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spring0304

木虫 (小有名气)
★ ★
sxdxrhyy(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论！ 2-14 10:07
可能你的样品有降解，产生了弥散。
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3楼2009-02-13 20:16:52
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flylxd

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫研究PI
★ ★
sxdxrhyy(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论！ 2-14 10:10
引物没设计好吧
特异性不强
还是退火温度不行

[ Last edited by flylxd on 2009-2-13 at 21:11 ]
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人既然不能选择生死，在这仅有一次生命里，活出自己最大的可能！
4楼2009-02-13 21:04:28
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
sxdxrhyy(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论！ 2-14 10:10
Taq酶加太多……或者模板浓度太高
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5楼2009-02-13 21:54:39
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
sxdxrhyy(金币+0,VIP+0):哈哈 具体点啦！ 2-14 10:11
可能性很多
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会当凌绝顶，一览众山小
6楼2009-02-13 22:56:40
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向阳坊

铜虫 (正式写手)
我也出现过这样的，确实问题很多，觉得跟DNA提取的好坏有关，还有你的引物量也有关，得一一排除
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7楼2009-02-14 16:49:57
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tuziluojie

银虫 (小有名气)
感觉最可能就是降解了，提dna操作过程一定要在冰上进行呢。
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8楼2009-02-15 23:17:12
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yumo

新虫 (小有名气)
谢谢上面各位的建议！十分感谢！
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9楼2009-02-15 23:35:45
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icicle_me

铜虫 (初入文坛)
可以尝试回收DNA，或者将DNA稀释后做模板再扩增（稀释10倍，50倍，100倍做梯度看看那）
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10楼2009-02-19 23:23:40
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