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银虫 (小有名气)

[求助] 免疫细胞标记求助已有1人参与

实验需要通过流式测定肿瘤部位不同免疫细胞的数量，我在取下肿瘤并对肿瘤进行消化提取出活的细胞后，该怎么对细胞进行标记从而进行分类。比如标记CD3，CD4，CD8，CD86等，是必须在活细胞状态下进行标记？这些免疫细胞的分子（CD8，CD4）都是在细胞的表面表达吗，不需要对细胞进行固定和穿透吗？

1楼 2017-09-09 21:31:14

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新虫 (小有名气)

感谢参与，应助指数 +1

1、CD系列都是膜蛋白，不需要固定和穿透，最好是活细胞标记
2、标记时你看自己是选择单标、双标还是多标？多标记要选择不同荧光以便流式好区分
3、不同抗体孵育就不需要多说了，一般买的抗体都带说明书，按照说明书来就可以了

2楼2017-09-12 15:03:26

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