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fyj1983

新虫 (初入文坛)

[交流] 流式细胞仪检测M2细胞相关问题,求帮助! 已有2人参与

我是新手,准备用流式细胞仪检测THP-1来源的M2细胞。请教各位战友和老师:

1.细胞表面的CD163和胞浆的CD68是同时检测还是分开检测?

2.除CD163和CD68抗体外,还需要准备哪些试剂?具体实验步骤怎样?有哪些特别需要注意的地方?

先谢谢各位老师!
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211411

新虫 (初入文坛)


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我也在准备做流式测M1和M2表型,CD68和CD163可以一起检测也可以分开吧。一起检测要买不同荧光标记,如FITC-CD163和PE-CD68。
我现在碰到一个问题想请教一下:THP-1诱导M2巨噬细胞贴壁后(满瓶),用1ml胰酶消化下来,加1ml培养基终止消化,然后移到离心管,4度1500转离心3分钟,在计数板上怎么没有细胞?
2楼2018-10-30 17:07:20
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xiumuwudiao

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以分开检测也可以同时检测 同时检测需要用不用荧光标记的抗体~染色时间和抗体比例我一般都参考说明书~最好在4度或冰上做实验~要检测M1 M2细胞首先得分出大群吧~培养的细胞没有做过 只检测过组织中的M1 M2~一般先需要圈出CD45等的群 然后在里面检测M1M2的marker~注意设置对照以及封闭

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3楼2018-10-30 19:19:29
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