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齐国小药童

木虫 (著名写手)

[交流] 用激光共聚焦显微镜能不能验证杀菌效果? 已有4人参与

请教一下能不能用激光共聚焦显微镜观察细菌?然后通过观察活菌和死菌的数量来验证杀菌效果呢?
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我就是我,是颜色不一样的焰火
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梦想天行

木虫 (职业作家)

2楼2017-09-06 19:52:39
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cappuccino7506

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
很多表征细菌死活的荧光染料,直接就可以用共聚焦看荧光,验证杀菌能力。文献很多

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3楼2017-09-06 19:54:13
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齐国小药童

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cappuccino7506 at 2017-09-06 19:54:13
很多表征细菌死活的荧光染料,直接就可以用共聚焦看荧光,验证杀菌能力。文献很多

好的好的,谢谢!
我就是我,是颜色不一样的焰火
4楼2017-09-06 20:48:56
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xinghun910

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
虽说有好多文献,个人觉得受视野限制,有局限,我觉得流式比较靠谱点

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5楼2017-09-06 21:18:45
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齐国小药童

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xinghun910 at 2017-09-06 21:18:45
虽说有好多文献,个人觉得受视野限制,有局限,我觉得流式比较靠谱点

谢谢您的回答 这个想法也是我同学告诉我的,我也没有做过,请问您说的流式是什么,可以跟我说一下原理么?谢谢!
我就是我,是颜色不一样的焰火
6楼2017-09-06 21:36:09
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xiecj

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
CLSM视野有限,只能定性半定量的去比较一下死活率,这个很简单,你可以去买baclight Dead/Live kits,随机拍一些视野然后统计分析一下吧!至于流式细胞术,这个方法的确有一些文献提到检测细菌存活率,但对技术人员要求较高,细菌不比细胞,细胞的个体比较大,在圈门的时候很容易与碎片区分开来,而细菌本身很小,极易与碎片区重叠造成分析统计误差,最传统且被认可的就是CFU了,不过太繁琐!绝对测定存活率用CFU,相对存活率,或者只是为了验证某种药物的抗菌性能,CLSM,流式细胞术,甚至MTT都可以做到

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7楼2017-09-09 00:15:11
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齐国小药童

木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by xiecj at 2017-09-09 00:15:11
CLSM视野有限,只能定性半定量的去比较一下死活率,这个很简单,你可以去买baclight Dead/Live kits,随机拍一些视野然后统计分析一下吧!至于流式细胞术,这个方法的确有一些文献提到检测细菌存活率,但对技术人员 ...

谢谢您的解答!昨天我也去问了负责实验室共聚焦显微镜的老师,他告诉我要提前买玻片,以及染料,您说的Baclight Dead/Live kits这个试剂盒应该很贵吧。然后针对您说的流式细胞技术,对于操作者要求高,而且存在的故有问题,我想想还是先用传统的悬液定量杀灭试验来做一下吧。时间充足的话我再考虑用这些方法进行吧。再次感谢
我就是我,是颜色不一样的焰火
8楼2017-09-09 15:00:27
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xiecj

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
baclight家的还好,一盒3000多,但是能用很久的

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9楼2017-09-09 18:20:45
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