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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » western电泳过程很奇怪
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xiaoguai0314

新虫 (初入文坛)

[求助] western电泳过程很奇怪 已有2人参与

刚开始上了样以后就发现跑得很慢，平常一样的电压特别慢，然后加了电压，跑了一会儿发现明显的弥散，marker的上半部还好，下半部就很奇怪，样品的地方整个散开了，一直到胶的下部，现在还在跑，非常慢，不知道是什么原因，还要不要继续

western电泳过程很奇怪


western电泳过程很奇怪-1


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1楼 2017-09-06 17:37:50
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Suph

银虫 (正式写手)
制的胶有问题吧

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2楼2017-09-06 17:39:16
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chaosyw

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
电泳液或凝胶配方加的有问题吗？推荐一篇wb操作方面的综述吧：
https://www.labome.com/method/We ... s-and-Reagents.html
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3楼2017-09-08 17:57:14
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biotpack2

捐助贵宾 (小有名气)
在加压的情况下蛋白迁移依旧很慢的原因有可能是因为电泳内槽的溶液泄漏了，从你的图看来电泳液加得不是很满，所以有可能是内槽的电泳液泄漏，影响蛋白迁移。
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4楼2017-09-11 12:08:09
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tiantian239

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

１　绿色的夹子不紧，内外槽之间漏液，这样现象可能是恒压状态下，电流很低。如果可以的话记录每次跑胶的胶的数量，使用的夹子编号，　　电压和电流记录，方便做对比。加满电泳液。
２　我遇到过是跑电泳的电源电压不稳，建议换一个电源试试。
３　配胶的聚丙烯酰胺质量和６.８　８.８的tris　是否质量好。建议每次胶都记录所用的液体。方便做对比。
４　电泳液是否是新的，配方是不是对的。有条件建议用新配的胶，新的电泳液。

希望对你有帮助哦
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5楼2017-09-12 02:57:01
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