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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 酿酒酵母42℃热激后破碎，20000rpm离心后上清液仍是浑浊的，什么原因？
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wenrongti

新虫 (小有名气)

[求助] 酿酒酵母42℃热激后破碎，20000rpm离心后上清液仍是浑浊的，什么原因？ 已有1人参与

如题，酿酒酵母破碎离心后，上清液蛋白含量为20mg/ml左右，但是我希望得到澄清透亮的蛋白液，而目前是很浑浊的状态，0.45um过滤后还是一样浑浊，用80%硫酸铵沉淀复溶后还是浑浊的，请求各位虫友，帮我分析下会是什么原因？多谢啦~

酿酒酵母42℃热激后破碎，20000rpm离心后上清液仍是浑浊的，什么原因？
蛋白液浑浊.jpg


酿酒酵母42℃热激后破碎，20000rpm离心后上清液仍是浑浊的，什么原因？-1
蛋白液浑浊-2.jpg
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1楼 2017-09-06 09:03:48
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哥本哈根达斯

金虫 (知名作家)
估计那本身就是不易溶于水的产物！

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2楼2017-09-06 09:11:37
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wenrongti

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 哥本哈根达斯 at 2017-09-06 09:11:37
估计那本身就是不易溶于水的产物！

可是离心和过滤都没法去除不溶物，而我真正需要的是30KD以下的蛋白，有什么方法可以分离30KD以下的蛋白吗？
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3楼2017-09-06 09:24:04
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哥本哈根达斯

金虫 (知名作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wenrongti at 2017-09-06 09:24:04
可是离心和过滤都没法去除不溶物，而我真正需要的是30KD以下的蛋白，有什么方法可以分离30KD以下的蛋白吗？...

有一个专门的蛋白纯化群你加一下吧，里面大神很多！

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4楼2017-09-06 09:38:59
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wenrongti

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 哥本哈根达斯 at 2017-09-06 09:38:59
有一个专门的蛋白纯化群你加一下吧，里面大神很多！
...

嗯，可以方便告诉下吗？谢啦
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5楼2017-09-06 09:58:44
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谦虚求解

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by wenrongti at 2017-09-06 09:24:04
可是离心和过滤都没法去除不溶物，而我真正需要的是30KD以下的蛋白，有什么方法可以分离30KD以下的蛋白吗？...

可以用超滤管离心一下，有各种型号来区分分子量，希望对你有用~
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6楼2018-08-29 20:45:36
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