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七夕雨99

新虫 (正式写手)

[求助] 新手求助一些关于液相分析中绘制标准曲线的问题! 已有1人参与

液相新手一枚,对于绘制标准曲线想求教一些问题。
1、测定液相分析中一个成分的含量,绘制标准曲线的时候对标准品的浓度有什么要求吗?可以直接从1mg/ml的标准品溶液,以二倍稀释法稀释为6个浓度梯度进行绘制标准曲线吗?
2、标准曲线绘制完成后,计算出线性回归方程和相关系数,那么线性范围怎么计算呢?我看文献都在表格中标出回归方程、相关系数、线性范围。但是我不明白线性范围是怎么计算的。
3、还有一点不明白怎么计算检出限和定量限,查了一下资料说是检出限是根据信号高度为基线噪音高的3倍时分析样品的浓度,定量限是根据信号高度为基线噪音的10倍时分析样品的浓度。那么信号高度是什么(是一种成分的标准品溶液在液相分析中的峰面积吗?)基线噪音是可以在液相仪器中可以查看的吗?
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紫筱枫影

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
七夕雨99: 金币+3, 有帮助 2017-09-05 10:09:49
1. 对比待测样品和标品的峰面积,然后找出面积基本一致的浓度,以这个浓度为基准,增加倍数和稀释。做出一个比较宽的范围,5-6个点。

2. 看回归系数几个9,如果回归系数低的话,线性就不好。

3.比较信号峰和噪音峰的峰高。仪器可以自动计算s/n。
2楼2017-09-05 10:03:43
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七夕雨99

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 紫筱枫影 at 2017-09-05 10:03:43
1. 对比待测样品和标品的峰面积,然后找出面积基本一致的浓度,以这个浓度为基准,增加倍数和稀释。做出一个比较宽的范围,5-6个点。

2. 看回归系数几个9,如果回归系数低的话,线性就不好。

3.比较信号峰和噪 ...

谢谢您的解答,但是我还是有点不太明白第二个问题,回归系数这个我明白,但是文献中有线性范围是5-500ug/ml这种类似的线性范围,我不明白这个是怎么计算出来的。
第三个问题中的信号峰和噪音峰都是根据跑标准品溶液是计算的吗?仪器自动给出s/n时的峰面积,然后将这个峰面积带入标准曲线计算浓度吗?
3楼2017-09-05 10:09:32
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yujun1214

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 七夕雨99 at 2017-09-05 10:09:32
谢谢您的解答,但是我还是有点不太明白第二个问题,回归系数这个我明白,但是文献中有线性范围是5-500ug/ml这种类似的线性范围,我不明白这个是怎么计算出来的。
第三个问题中的信号峰和噪音峰都是根据跑标准品溶 ...

线性范围是根据标曲浓度范围来的,例如你的标曲浓度是5-500,且r系数很好,那线性范围只能在5-500这个浓度范围,不能随意的增加浓度,5-1000就不可以,要重新计算r系数。定量限假如你进一针浓度为10ug/ml,信噪比为15,那你再进一针2ug/ml看看信噪比是不是3,如果是,就是定量限的浓度,如果不是再稍微调整1.5或者2.5微调,重复至少5针,并做精密度和准确度考察

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4楼2017-09-05 11:27:51
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七夕雨99

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yujun1214 at 2017-09-05 11:27:51
线性范围是根据标曲浓度范围来的,例如你的标曲浓度是5-500,且r系数很好,那线性范围只能在5-500这个浓度范围,不能随意的增加浓度,5-1000就不可以,要重新计算r系数。定量限假如你进一针浓度为10ug/ml,信噪比为 ...

谢谢您的回复!5-500的意思就是,绘制标准曲线时的梯度浓度选取的几个点都是在这个范围之内吗?梯度浓度不一定是倍数稀释或增加的吗?那如果我选取的梯度浓度为500ug/ml,二倍稀释到3.90625ug/ml时绘制标准曲线。那么我的线性范围应该是多少呢?
5楼2017-09-05 14:19:53
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yujun1214

木虫 (著名写手)

不一定一定要按照同样的倍数稀释,个别一两个点可以是3倍或者1.5倍但是倍数稀释的结果的线性结果会相对好点,就是r2系数,线性范围就是你标曲浓度范围哦

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6楼2017-09-05 14:34:35
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七夕雨99

新虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yujun1214 at 2017-09-05 14:34:35
不一定一定要按照同样的倍数稀释,个别一两个点可以是3倍或者1.5倍但是倍数稀释的结果的线性结果会相对好点,就是r2系数,线性范围就是你标曲浓度范围哦

好的,谢谢您
7楼2017-09-05 15:27:34
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