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qqq7981

木虫 (著名写手)

男人要有钱,和谁都有缘。

[交流] qRT-PCR这里面q什么意思+MTT增值曲线问题(有效期至2009-02-20)

qRT-PCR这里面q什么意思?全称是什么?具体步骤怎样?需要哪些试剂?

RT-PCR与PCR有啥区别?

MTT增值曲线应该如何画?用那种格式的图形画?最好用什么软件做?


[ Last edited by qqq7981 on 2009-2-12 at 18:53 ]

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你快回来,我一人忽悠不来! ....
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echocean

新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
qqq7981(金币+5,VIP+0):good 2-16 11:48
实时定量PCR。
和PCR不同的是,一般PCR从DNA序列入手扩增。
RT-PCR,real-time PCR,是要对材料进行新鲜取样,立刻提RNA,将transcriptome——转录组,即总RNA提取,再反转录成cDNA,用特异引物扩增目标序列,和用house hold gene的序列做内参,然后标定某一时刻,某转录产物的量。
4楼2009-02-13 20:19:46
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3046261929708

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
qqq7981(金币+4,VIP+0):thx 2-12 19:10
“定量PCR”(quantitative PCR)
A液:变性液    B液:醋酸钠溶液    C液:酚/氯仿/异戊醇混合液(50:49:1) D液:异丙醇 E液:75%乙醇 F液:DEPC处理的灭菌去离子水 G液:RNA酶抑制剂
H液:反转录反应液   液:反转录酶   J液:PCR反应液  K液:Taq DNA聚合酶(0.5u/µl)   L液:矿物油   M液:50倍TAE电泳缓冲液   N液:溴化乙锭溶液
0液:上样缓冲液
一)预变性:
二)变性--退火--延伸循环
三)用PCR仪扩增时,(变性.退火,延伸)循环完成后,继续72度延伸了10分钟
你若先走了,回头时就不要怪我背对着你!
2楼2009-02-12 19:00:40
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3046261929708

铜虫 (小有名气)

反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR)
RT-PCR(real-time PCR)
你若先走了,回头时就不要怪我背对着你!
3楼2009-02-12 19:04:15
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