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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 漆酶酶活测定求助
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zyd0116

银虫 (初入文坛)

[求助] 漆酶酶活测定求助 已有3人参与

从网上购买的商品漆酶粉剂，用0.1M的醋酸钠buffer（pH5）配置成5g/L的酶液，采用0.5mM的ABTS为底物。2mL底物和1mL酶液混合后反应3分钟后测定420nm的吸光度为0.064。这1mL的酶液酶活应该是多少呢？酶活定义是U = μmol. min-1，文献上查的ε=360000 M-1.cm-1。我算的结果是1.889*10-3 U/mL。这也太低了吧？是不是我的计算有问题呢？
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1楼 2017-08-30 10:28:54
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婀娜小薯条

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般买的漆酶都不是完全纯的，你虽然配的是5g/L，但其实真正的漆酶浓度可能只是它的几百分之一，所以你要先检测原液中漆酶的浓度，就是检测蛋白的浓度，然后用U/这个浓度才是它的比活
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2楼2017-09-01 14:39:06
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hanmuyang

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
3楼2018-03-07 10:55:56
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田盛兰

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 婀娜小薯条 at 2017-09-01 14:39:06
一般买的漆酶都不是完全纯的，你虽然配的是5g/L，但其实真正的漆酶浓度可能只是它的几百分之一，所以你要先检测原液中漆酶的浓度，就是检测蛋白的浓度，然后用U/这个浓度才是它的比活

请问可以用考马斯亮蓝或者BCA测漆酶的浓度吗

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4楼2018-05-04 22:25:03
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canyue1127

金虫 (正式写手)
文献里用的是同一个牌子同一个型号？

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5楼2018-05-07 08:54:52
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GP009

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hanmuyang at 2018-03-07 10:55:56
您好，您的问题解决了吗？我也遇到了类似的问题，能告诉我怎么办吗？

请问你测漆酶活性的方法解决了吗？我现在也是遇到这样的问题，想请教一下。

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6楼2018-10-15 19:58:37
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GP009

新虫 (小有名气)
请问楼主你所用的0.5mM的ABTS溶液是如何配制的？

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7楼2018-10-15 20:06:37
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han525

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问楼主现在这个问题有解决办法吗？现在我做这个实验用这个方法也测的数据不行，不知道问题出在哪，求教

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8楼2022-06-01 01:14:03
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