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wyc428suo

银虫 (小有名气)

[求助] 定量PCR3次机械重复差异大,内参不正常

荧光定量PCR生物学重复以及机械重复之间的差异都挺大
做定量PCR,不仅生物学重复差异大,就连三次机械重复之间有时候都挺大的。而且做了4块板子,都是类似的结果。其中一共3个组织,只有一个组织有这样的问题,其余2个组织结果挺稳定,内参结果也稳定。但是那个不好做的组织,内参的CT值都挺大。
请问,这样子是不是RNA提取的问题? 这个不太好的组织RNA三个生物学260/280分别为1.8  2.1 2.0  260/230 分别为1.95  1.64  1.96。另外2个组织的这个值也差不多啊
跑了个条带,RNA降解挺严重
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fighting
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dadd饭团

新虫 (初入文坛)

想问问您解决了吗? 我做也是差异很大
同一组模板,在两次实验中 基因表达量差异很大,
三组机械平行之间的重复率 也不好

感谢感谢
2楼2018-08-22 15:58:43
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