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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教：引物设计问题！
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outstandin

禁虫 (小有名气)
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1楼 2009-02-11 17:24:34
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张力民1598

铜虫 (小有名气)
★ ★
outstandin(金币+1,VIP+0):谢谢 2-15 19:59
outstandin(金币+1,VIP+0):THANK YOU ! 2-15 19:59
NCBI上面提供的是各个物种的序列，你要找出你要的对应物种的序列才行，理论上应该只有一个是你需要的。
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2楼2009-02-11 18:06:27
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
ncbi查到序列之后，有的能够查到编码区cds序列（不知道是不是你说的保守区），所以，好多信息都可以查到
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会当凌绝顶，一览众山小
3楼2009-02-12 01:19:53
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amilie030312

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来~ 2-14 15:16
outstandin(金币+2,VIP+0):仔细，明了 2-15 19:54
首先要看你要做的是已知基因还是未知基因，如果是已知的基因那就好办了，看你要做的是哪个部分的，直接查到你要做的那个部分的基因的NCBI登陆页面，然后直接看人家发表的文章用上面的引物和体系就可以了，如果是做未知基因的那就要把所有能查到和这个基因所有物种的序列都找到，然后找保守序列在用设计软件来设计引物，这里面注意的地方还满多的，可以随便在网上搜一下，好多讲引物设计原则的，注意那几点就可以了，然后如果种间差距比较大的以亲缘关系越近的参考系数越大，不知道我说明白了没。
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4楼2009-02-13 14:15:42
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fraser

银虫 (正式写手)
★
outstandin(金币+1,VIP+0):谢谢 2-15 20:01
同意楼上的，一般一个基因会被分成很多部分克隆出来，然后拼接！
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5楼2009-02-13 16:49:12
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jevon

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来~ 2-14 15:16
找到你的参考序列信息，即你所想要克隆的基因序列，一般只需要一个物种的吧。
然后根据序列信息设计上下游引物，就可以做实验了~~
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6楼2009-02-14 13:06:20
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HDLWH

木虫 (正式写手)
有道理
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7楼2009-02-15 08:11:47
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outstandin

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
8楼2009-02-15 19:58:05
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