应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 蛋白纯化后老是失活
41/1返回列表
查看: 1225  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

max小线

新虫 (初入文坛)

[交流] 蛋白纯化后老是失活 已有3人参与

最近在做重组蛋白的纯化，用200w超声破碎细胞10min，经纯化柱纯化后测酶动力学，发现酶无活性，而且做了几次都没有活性，希望大神指点一下( ?? ??? )

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-08-29 09:48:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

水逝雁南飞

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是什么表达体系？原核表达还是真核表达？表达的是原核蛋白还是真核蛋白？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2017-08-29 15:51:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biotpack2

捐助贵宾 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-08-31 07:45:35
提纯的酶没有活性原因有很多的，例如蛋白序列有误，原核系统表达的蛋白不具有蛋白活性，蛋白活性本身不稳定或者在提取过程中失活都有可能造成蛋白活性丧失。一个一个去排除还是会比较麻烦，建议多查找文献，看看有没有别的实验室提纯过这个蛋白测定酶活以及用的什么表达体系。
赞一下 回复此楼
3楼2017-08-30 21:43:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦想与理想

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
超声破碎有没有控制温度？这个酶对温度是不是敏感？原因很多，温度可能是一个方面。
赞一下 回复此楼
相信自己
4楼2017-09-01 10:35:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 max小线 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-28 11:48 by winsaint
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+5) +12 晴天加油 2026-08-26 13/650 2026-08-28 11:32 by skyjudy
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +7 苏东坡二世 2026-08-23 7/350 2026-08-27 18:14 by 瞬息宇宙
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[职场人生] 学生撞见辅导员送外卖，第二天全班都沉默了 +3 鲸鱼融金_浙江_� 2026-08-22 3/150 2026-08-26 09:01 by zzuzxg
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭