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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » lncRNA细胞定位
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lucky_1000

新虫 (正式写手)

[求助] lncRNA细胞定位 已有2人参与

大家好 我想用qPCR做lncRNA的细胞定位 除了GAPDH和U6 还需要其它的内参吗？图中的百分比是怎么计算出来的？请大家帮帮忙 谢过先

lncRNA细胞定位


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1楼 2017-08-27 23:35:43
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水逝雁南飞

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-07 07:42:53
我们qPCR做的比较少，内参我们用的是actin，GAPDH和18s，因为内参也有不稳定的时候，所以一般情况下要多个内参一起联用

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2楼2017-08-28 12:15:47
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lucky_1000

新虫 (正式写手)
好的 知道了 谢谢

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3楼2017-08-28 16:28:58
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lucky_1000

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 水逝雁南飞 at 2017-08-28 12:15:47
我们qPCR做的比较少，内参我们用的是actin，GAPDH和18s，因为内参也有不稳定的时候，所以一般情况下要多个内参一起联用

我现在不明白的是做GAPDH和u6，内参用的是什么？

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4楼2017-08-28 16:32:26
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水逝雁南飞

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by lucky_1000 at 2017-08-28 16:32:26
我现在不明白的是做GAPDH和u6，内参用的是什么？
...

你可以考虑actin和18s一起用啊

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5楼2017-08-28 16:47:53
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匿名

用户注销 (初入文坛)
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6楼2017-09-05 08:24:15
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lucky_1000

新虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dml10292617 at 2017-09-05 08:24:15
楼主问题解决没，我现在也在做相似的东西，不知道怎么选内参

没有

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7楼2017-09-05 13:09:38
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-07 07:43:13
引用回帖:
4楼: Originally posted by lucky_1000 at 2017-08-28 16:32:26
我现在不明白的是做GAPDH和u6，内参用的是什么？
...

GAPDH就是内参。。。。Q做定量的话，最少要做3个内参，其实2个就够了，不过如果想发好一点，3个吧。目标基因加3个内参，然后综合ct值，软件有公式帮你直接算的。
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8楼2017-09-06 08:50:46
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lucky_1000

新虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by snoopytbw at 2017-09-06 08:50:46
GAPDH就是内参。。。。Q做定量的话，最少要做3个内参，其实2个就够了，不过如果想发好一点，3个吧。目标基因加3个内参，然后综合ct值，软件有公式帮你直接算的。...

具体怎么做呢？能讲的详细点吗？

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9楼2017-09-07 07:01:09
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