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memo989

铁虫 (初入文坛)

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专业: 生物化学

[求助] 关于pbbr1mcs-2这个载体的多克隆位点已有1人参与

这个载体上有一段lacZ基因，在lac启动子下表达。它的多克隆位点位于lacZ内部，文献上有人做表达直接在多克隆位点插入目的基因，请问，这样表达出来的蛋白是否带有lacZ的部分氨基酸呢？

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1楼 2017-08-25 17:11:18

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memo989

铁虫 (初入文坛)

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2楼2017-08-26 18:19:24

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memo989

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3楼2017-08-27 15:49:51

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这你妹

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专业: 生物化学

【答案】应助回帖

楼主你好，最近我也在构建含有我的目的基因的pBBR1MCS2重组质粒，我在我的目的片段ATG前6个碱基处添加了RBS，插入Hind III和BamH I位点。
因为多克隆位点位于LacZ基因中，请问你在表达你的目标蛋白的时候有没有添加IPTG诱导啊？如果不诱导会有目的蛋白表达吗？
望回复，谢谢！

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4楼2018-04-20 23:04:29

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