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zlt8462

新虫 (小有名气)

[求助] 滚环扩增产物鉴定

本人用标记了荧光和淬灭基团的茎环与滚环扩增产物进行杂交,来检测滚环扩增产物的多少。但是现实是我的茎环无论如何都结合不上我的滚环产物。序列比对也没有问题,荧光定量PCR和荧光分光光度计平台上都试过,都没有信号,但是电泳显示的滚环扩增的条带是有的。求助各位虫友,望多多交流。(注:不考虑用荧光染料结合的方法)
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我不是分割线

新虫 (小有名气)

楼主可以分享下你的滚环的具体方法吗?谢谢了!

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-09-02 17:24:59
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chenj-315

银虫 (正式写手)

2楼2017-08-26 01:28:42
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zlt8462

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chenj-315 at 2017-08-26 01:28:42
茎环结构太稳定了么

应该不会的,我用公司合成的模拟的滚环产物的短链去与茎环杂交是可以打开茎环的,但是把茎环放进滚环扩增体系里就打不开了

发自小木虫Android客户端
3楼2017-08-26 10:27:54
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钟泽澄

新虫 (初入文坛)

考虑Tm值,提高温度试了吗?

发自小木虫IOS客户端
6楼2017-12-21 14:48:12
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