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2017mwl

新虫 (小有名气)

[交流] 酶连过夜 已有4人参与

1600bp左右的条带 t4酶连接过夜多久合适

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1楼 2017-08-24 16:58:52
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18253592055

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-30 07:43:36
看你是哪个公司的连接酶，实验室之前一般过夜是16h，也有快速连接酶，而且我觉得连接的话跟你的片段大小没啥关系吧，之前构过2.1kb的也没有刻意改连接时间，希望能帮到你

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2楼2017-08-24 19:08:12
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2017mwl

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 18253592055 at 2017-08-24 19:08:12
看你是哪个公司的连接酶，实验室之前一般过夜是16h，也有快速连接酶，而且我觉得连接的话跟你的片段大小没啥关系吧，之前构过2.1kb的也没有刻意改连接时间，希望能帮到你
...

Takara公司的

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3楼2017-08-24 20:54:46
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18253592055

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 2017mwl at 2017-08-24 20:54:46
Takara公司的
...

十六个小时足够了

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4楼2017-08-24 21:17:13
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木吉吉

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们实验室用的NEB的，一般就是12-16h

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5楼2017-08-25 18:58:04
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1006641214

木虫 (正式写手)

wublab
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
酶切时间要控制好，太久了可能会乱切，连接多久都可以

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你好
6楼2017-08-27 11:55:43
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myeyerlong

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-30 07:43:50
我用的NEB-T4 ligase。连过4degC overnight, 16degC overnight, 14degC overnight, RT 20min/ 1h/ >3h/ overnight。都可以成功。
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7楼2017-08-30 05:31:05
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2017mwl

新虫 (小有名气)
内容已删除
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8楼2017-08-30 09:23:37
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