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白浅2009铁虫 (小有名气)
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[求助]
人血清补体ELISA 已有1人参与
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刚开始做ELISA,第一次做的标曲还可以，样品，阳性对照，阴性对照的数值也正常，就是有的样品稀释倍数太大，超过标曲范围，打算重新稀释 减少稀释的倍数，第一次样品1:500稀释，第二次打算1:50稀释，结果标曲正常，但是所有样品值仍小于标准品最低浓度的OD值，并且阳性，阴性和样品的吸收值差不多，两次操作基本上差不多，唯一的不同就是人血清以及样品稀释液 ，第一次是没拆封的血清，为了防止补体活化，融化成带有碎冰的状态测的，第二次是接着用的第一次的样品测的。 样品稀释液第一次用的是灭了菌的纯化水，第二次没灭菌 ，不知道有影响没，求大神帮助分析 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2017-08-25 20:53:09
【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
白浅2009: 金币+66, ★★★很有帮助 2017-10-12 21:33:31
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白浅2009: 金币+66, ★★★很有帮助 2017-10-12 21:33:31
| 你的标曲和阴阳性每次实验都是需要现稀释的吗？如果是，则第二次问题不是出在稀释液上，如果不是就不排除稀释液的问题。还有你第一次实验说有些样品稀释倍数过大超出检测限了，我想问一下你这次实验中有测出来样品是阳性或者说落在标曲的线性范围内的吗？如果都没有，可能是样品本身是不是经过什么处理导致补体都失活了，如果不是也有可能是样品经过一次解冻过程补体成分降解了，好像说补体对冻融过程也比较敏感的。能不能把你的实验步骤尽量说详细了，可能就是某些不太在意的细节部分出问题了，而你自己没有意识到，所以找不到原因。希望对你有帮助。 |
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白浅2009
3楼2017-08-26 15:49:12
白浅2009
铁虫 (小有名气)
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- 专业: 药物代谢与药物动力学
4楼2017-10-12 21:32:26