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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 克隆载体构建时测序相关
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

高保真酶不贵呀，怎么可能买不起呢？有你这么多测序的钱说不定都够买好多管高保真酶了。
如果是突变出现在同一位点，那说明序列本身就是这样子。
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
11楼2017-08-25 17:33:49
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木吉吉

新虫 (正式写手)
最近实验室有送Vazyme的试用装，比TAKARA的便宜而且很好扩，可以考虑下。你也可以比对下氨基酸序列是否一致，有些情况，如果氨基酸一致，不影响蛋白表达也是可以的，而且如果每次都是同样位点不一致那可能是模板问题，可能是库里序列就不准确，比如棉花的全基因组序列也没出来几年，所以库里序列也是有可能有偏差的

发自小木虫Android客户端
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12楼2017-08-25 18:53:00
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houge1160

禁虫 (初入文坛)
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13楼2017-08-30 11:12:17
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houge1160

禁虫 (初入文坛)
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14楼2017-08-30 11:12:50
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houge1160

禁虫 (初入文坛)
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15楼2017-08-30 11:13:50
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yufeiwaner

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

看一下氨基酸序列有没有变化，没变化就没问题。
实在不想买高保真酶，多换几种taq，设计几对引物扩增包含突变位点的序列，测出来哪个碱基多就算哪个。
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16楼2017-08-30 11:28:21
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匿名

用户注销 (小有名气)
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17楼2017-09-05 21:07:54
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碎碎小叶

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

普通Tag酶只是检测用的，PCR扩增片段要采用高保真酶，现在我们用的Mix，挺好用的。
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18楼2017-09-12 16:59:57
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非洲木棉

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这个肯定要用高保真啊
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19楼2017-09-18 13:49:50
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