24小时热门版块排行榜    

查看: 1433  |  回复: 10

落日余晖34

木虫 (正式写手)

[求助] 转接二级种子液培养1h后出现了悬浊沉淀

最近在做用crispr-cas9敲除克雷伯氏菌的一个基因,已经将cas9质粒转入菌株,打算用含有cas9质粒的菌株做电转感受态,转另外的质粒,但是我从KAN板上接到10ml LB摇瓶过夜培养后转接50ml LB做二级种子,培养了1h后出现了白色悬浊沉淀,培养温度为30度,转速为100rpm,我询问了师姐说是菌死了,我从冰箱 里面换了新的KAN之后还是出现白色悬浊沉淀,另外培养基也是新配的,做RED敲除的时候也遇到了这种情况,不知道各位吧友是否遇到过这种情况。

转接二级种子液培养1h后出现了悬浊沉淀
IMG_20170822_085428.jpg
回复此楼
有时候总要努力下
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yangmeng0711

新虫 (小有名气)

继续摇,有可能是菌体增多成团

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-08-22 19:58:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangmeng0711

新虫 (小有名气)

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-23 23:03:12
不是所有的菌都跟大肠一样的,我做的链霉菌就是这样,跟它们的形体有关,可以加玻璃珠或者弹簧在摇瓶中

发自小木虫IOS客户端
7楼2017-08-23 07:57:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lijiawei2050

新虫 (小有名气)

2楼2017-08-22 14:36:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落日余晖34

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lijiawei2050 at 2017-08-22 14:36:59
为啥叫做“吧友”?

虫友

发自小木虫Android客户端
有时候总要努力下
3楼2017-08-22 14:58:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落日余晖34

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yangmeng0711 at 2017-08-22 19:58:03
继续摇,有可能是菌体增多成团

后面继续摇确实会浓一些,但是这样会影响od的测定吧。菌体成团了

发自小木虫Android客户端
有时候总要努力下
5楼2017-08-22 22:32:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落日余晖34

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yangmeng0711 at 2017-08-22 19:58:03
继续摇,有可能是菌体增多成团

还有那个菌体增多为什么会成团啊…

发自小木虫Android客户端
有时候总要努力下
6楼2017-08-23 07:34:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落日余晖34

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yangmeng0711 at 2017-08-23 07:57:16
不是所有的菌都跟大肠一样的,我做的链霉菌就是这样,跟它们的形体有关,可以加玻璃珠或者弹簧在摇瓶中

嗯,确实如此,但是出现这种情况的话会影响测od吧?因为做感受态要等菌长到一定od之后加入诱导剂进行诱导

发自小木虫Android客户端
有时候总要努力下
8楼2017-08-23 08:23:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落日余晖34

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yangmeng0711 at 2017-08-23 07:57:16
不是所有的菌都跟大肠一样的,我做的链霉菌就是这样,跟它们的形体有关,可以加玻璃珠或者弹簧在摇瓶中

一级种子是从板上接的,二级种子的话接种量为1%

发自小木虫Android客户端
有时候总要努力下
9楼2017-08-23 09:24:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangmeng0711

新虫 (小有名气)

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-23 23:03:29
可不可以震荡测OD值,其实也可以根据摇的时间大致差不多的时候做感受态吧,无外乎感受态的活性高低而已

发自小木虫IOS客户端
10楼2017-08-23 19:22:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 落日余晖34 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:37 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:30 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:46 by etmYJ6d2rquH
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-09-29 15:15 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:24 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-29 13:56 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[找工作] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
请填处理意见