应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 转接二级种子液培养1h后出现了悬浊沉淀
111/2返回列表12下一页
查看: 1352  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

落日余晖34

木虫 (正式写手)

[求助] 转接二级种子液培养1h后出现了悬浊沉淀

最近在做用crispr-cas9敲除克雷伯氏菌的一个基因，已经将cas9质粒转入菌株，打算用含有cas9质粒的菌株做电转感受态，转另外的质粒，但是我从KAN板上接到10ml LB摇瓶过夜培养后转接50ml LB做二级种子，培养了1h后出现了白色悬浊沉淀，培养温度为30度，转速为100rpm，我询问了师姐说是菌死了，我从冰箱 里面换了新的KAN之后还是出现白色悬浊沉淀，另外培养基也是新配的，做RED敲除的时候也遇到了这种情况，不知道各位吧友是否遇到过这种情况。

转接二级种子液培养1h后出现了悬浊沉淀
IMG_20170822_085428.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
有时候总要努力下
1楼 2017-08-22 14:16:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yangmeng0711

新虫 (小有名气)
继续摇，有可能是菌体增多成团

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2017-08-22 19:58:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangmeng0711

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-23 23:03:12
不是所有的菌都跟大肠一样的，我做的链霉菌就是这样，跟它们的形体有关，可以加玻璃珠或者弹簧在摇瓶中

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2017-08-23 07:57:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lijiawei2050

新虫 (小有名气)
为啥叫做“吧友”？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2017-08-22 14:36:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落日余晖34

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lijiawei2050 at 2017-08-22 14:36:59
为啥叫做“吧友”？

虫友

发自小木虫Android客户端
回复此楼
有时候总要努力下
3楼2017-08-22 14:58:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落日余晖34

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yangmeng0711 at 2017-08-22 19:58:03
继续摇，有可能是菌体增多成团

后面继续摇确实会浓一些，但是这样会影响od的测定吧。菌体成团了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
有时候总要努力下
5楼2017-08-22 22:32:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落日余晖34

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yangmeng0711 at 2017-08-22 19:58:03
继续摇，有可能是菌体增多成团

还有那个菌体增多为什么会成团啊…

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
有时候总要努力下
6楼2017-08-23 07:34:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落日余晖34

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yangmeng0711 at 2017-08-23 07:57:16
不是所有的菌都跟大肠一样的，我做的链霉菌就是这样，跟它们的形体有关，可以加玻璃珠或者弹簧在摇瓶中

嗯，确实如此，但是出现这种情况的话会影响测od吧？因为做感受态要等菌长到一定od之后加入诱导剂进行诱导

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
有时候总要努力下
8楼2017-08-23 08:23:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落日余晖34

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yangmeng0711 at 2017-08-23 07:57:16
不是所有的菌都跟大肠一样的，我做的链霉菌就是这样，跟它们的形体有关，可以加玻璃珠或者弹簧在摇瓶中

一级种子是从板上接的，二级种子的话接种量为1%

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
有时候总要努力下
9楼2017-08-23 09:24:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangmeng0711

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-23 23:03:29
可不可以震荡测OD值，其实也可以根据摇的时间大致差不多的时候做感受态吧，无外乎感受态的活性高低而已

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
10楼2017-08-23 19:22:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 落日余晖34 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 可靠消息，8月21号(明天)放榜 +11 医学老男孩 2026-08-20 13/650 2026-08-20 10:50 by anjeeshine
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +13 基诺咪客 2026-08-17 17/850 2026-08-20 10:43 by wangyue2015
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +21 yaoyewhu2008 2026-08-20 21/1050 2026-08-20 10:37 by Vivilian
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +15 Ldrop2023 2026-08-13 19/950 2026-08-20 10:30 by 陈晨晨陈啊
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +55 医学老男孩 2026-08-13 125/6250 2026-08-20 09:02 by 医学老男孩
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭