| 查看: 1805 | 回复: 8 | |||
[交流]
膜片钳电生理测量技术操作交流
|
|
我是膜片钳新手，全细胞模式进行封接时，电极接触细胞电阻开始慢慢增大，什么时候就可以开始负压吸引了？电阻达到800兆欧的时候，我用注射器抽压，测试脉冲没有任何反应，电阻也没有变化，达不到1GΩ，然后再将电极往下移，电阻就上来了，可以在2GΩ左右维持一段时间，但有时也会突然出现断路信号，应该怎么操作才能得到稳定的封接和破膜？ 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有195人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
那半句誓言
金虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 3014.3
- 散金: 198
- 红花: 6
- 帖子: 532
- 在线: 394.5小时
- 虫号: 2976380
- 注册: 2014-02-18
- 专业: 神经生物学
2楼2017-08-21 12:03:19
送红花一朵 |
谢谢，我看过一遍，也是按书中写得那样反复的实验，就是得不到全细胞记录，就是从电极接触细胞开始，就不会吸附破膜了，是用注射器通过很细的乳胶管与电极夹持器连接后抽吸施压，不知道是装置的问题还是细胞表面不干净呢，请问前辈有经验吗 发自小木虫Android客户端 |
3楼2017-08-22 08:13:07
那半句誓言
金虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 3014.3
- 散金: 198
- 红花: 6
- 帖子: 532
- 在线: 394.5小时
- 虫号: 2976380
- 注册: 2014-02-18
- 专业: 神经生物学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
我们做的是脑片 电极接触到细胞后 再下压一点 撤去正压后 阻值会上升一点 之后用200ml黄枪头插进软管用嘴吸 发自小木虫IOS客户端 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
4楼2017-08-22 10:35:20
送红花一朵 |
我也试试用嘴吸，如果电极接触细胞，然后下压阻值增大，不给负压也能增加到GΩ，也能稳定一段时间，再把电极上升后电阻会下来，这个GΩ是怎么出来的呢？可以当成是封接好了吗，  发自小木虫Android客户端 |
5楼2017-08-22 20:12:24
 |
6楼2017-08-22 20:35:21
那半句誓言
金虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 3014.3
- 散金: 198
- 红花: 6
- 帖子: 532
- 在线: 394.5小时
- 虫号: 2976380
- 注册: 2014-02-18
- 专业: 神经生物学
7楼2017-08-23 08:49:44
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
我们一般变化0.3到0.4就开始封接，比如电极接触到细胞为2Ω时，把微操调到7档，继续向下，直到电阻由2Ω变化到2.4Ω时，迅速给负压（抽吸），注意力气不要太大，当电阻过1gΩ时放掉负压（平常要是800左右我也会放掉负压，多数情况下可以上g，从而封接），封接之后，继续给负压，一定要轻轻用力，基线向上变动的时候，放开负压，重复，直到破膜为止，希望可以帮到你 发自小木虫Android客户端 |
8楼2017-09-14 22:38:22
|
请问为什么要放掉负压？不是持续给负压直到测定结束吗？我施加负压的时候阻值上升的特别慢，头疼的是，达到400M，显微镜观察细胞膜就模糊了。请问前辈封接的时候遇到过这个问题吗？一般达到GΩ需要多长时间 发自小木虫Android客户端 |
9楼2017-10-07 15:25:45