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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 碱法提取结合态多酚，吹干后100%甲醇复溶，测量总酚时出现沉淀
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dcr408216613

新虫 (初入文坛)

[求助] 碱法提取结合态多酚，吹干后100%甲醇复溶，测量总酚时出现沉淀 已有2人参与

本人在提取结合态多酚过程：80%甲醇提取游离态多酚后的固体残留，再用4M NaOH 处理2小时。调pH 到2， 用乙酸乙酯萃取5次，氮气吹干乙酸乙酯，然后用100%甲醇复溶。复溶后的液体澄清（复溶时小心吸取清液）。

在用福林酚法测总酚时发现加了福林酚后出现浑浊（100uL提取液+200uL福林酚试剂），再加碳酸钠后白色沉淀（800uL) （图）。开始排除原因时发现：100%甲醇复溶后的提取液加水即出现浑浊，静止后白色颗粒。溶液调整至80%甲醇，过0.45um 尼龙膜得到澄清液，再加水或者福林酚试剂和7.6%碳酸钠依旧有浑浊。

自己还不是很清楚什么原因，但猜测是水不溶性的物质？乙酸乙酯吹干后是不是应该用水复溶？如果是为什么？求各位大神指点！

碱法提取结合态多酚，吹干后100%甲醇复溶，测量总酚时出现沉淀
IMG_0218.JPG
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1楼 2017-08-17 14:47:27
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Lion ivy

新虫 (初入文坛)
或者你查一下各个溶剂的极性和非极性 换一种溶剂呢？ 我的一些实验步骤和你相像 做了一年多 从没出现过这样的情况 很好的问题

发自小木虫IOS客户端
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4楼2017-08-18 11:34:02
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查看全部 8 个回答

晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dcr408216613: 金币+2 2017-08-21 13:08:59
多酚一般情况下的水溶性都是比较差的，

即使是配置多酚类标准品，有些都需要醇类先溶解后，再用水稀释。
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及时行乐，人生不留遗憾！
2楼2017-08-17 15:56:00
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dcr408216613

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-08-17 15:56:00
多酚一般情况下的水溶性都是比较差的，

即使是配置多酚类标准品，有些都需要醇类先溶解后，再用水稀释。

  谢谢！那我先稀释5-10倍再试。就是有点担心浓度稀释太大UV 读数太低。另：担心跑HPLC时也会析出颗粒（刚开始的流动相是0.05%甲酸水）。
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3楼2017-08-17 16:01:48
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是什么样品，是不是有脂溶性东西。
为什么 非要用乙酸乙酯萃取呢？样品很浑浊么？直接过滤不行么，然后调节ph到酸性。
如果是已经提取出来的多酚，水溶性应该是不错的啊，出现白色沉淀，感觉是脂溶性的东西被乙酸乙酯提取出来，浓度变大。
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5楼2017-08-18 19:05:58
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