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我要睡觉

新虫 (小有名气)

[求助] 灌流固定 已有1人参与

做IHC,HE及尼式染色,用小鼠脑组织,在网上查的是用灌流固定,直接把脑组织取出来固定后做出来的效果会不太好?灌流固定,固定液是会经过心脏流入大脑么以此来达到充分固定的效果么?感谢!

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爱你的飞享

金虫 (著名写手)

2楼2017-08-17 14:14:52
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我要睡觉

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 爱你的飞享 at 2017-08-17 14:14:52
不懂

是我没有说清楚么

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3楼2017-08-17 16:30:40
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爱你的飞享

金虫 (著名写手)

嗯嗯,灌流我知道,你说的我不知道

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4楼2017-08-17 16:31:41
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清月城堡

金虫 (正式写手)

先灌流固定,这样一方面甲醛固定使蛋白完全变性,另一方面去除血细胞对切片影响。先用生理盐水快速滴注,再换4%PFA慢滴30分钟。

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5楼2017-08-18 09:08:16
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我要睡觉

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 爱你的飞享 at 2017-08-17 16:31:41
嗯嗯,灌流我知道,你说的我不知道

我的意思是,我取的是脑组织,但是灌流固定从心脏注射,为什么呢?

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6楼2017-08-18 13:14:47
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我要睡觉

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 清月城堡 at 2017-08-18 09:08:16
先灌流固定,这样一方面甲醛固定使蛋白完全变性,另一方面去除血细胞对切片影响。先用生理盐水快速滴注,再换4%PFA慢滴30分钟。

嗯嗯,谢谢。只有脑组织才用灌流固定么

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7楼2017-08-18 13:15:47
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清月城堡

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 我要睡觉 at 2017-08-18 13:15:47
嗯嗯,谢谢。只有脑组织才用灌流固定么
...

通常都是要灌注的,比如肺切片。这样可以去除血细胞,减少背景对实验结果的影响;另一方面灌注固定过,不会损害组织完整性。我以前做的关节滑膜组织切片,也是最好灌注固定。

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8楼2017-08-18 15:33:45
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我要睡觉

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 清月城堡 at 2017-08-18 15:33:45
通常都是要灌注的,比如肺切片。这样可以去除血细胞,减少背景对实验结果的影响;另一方面灌注固定过,不会损害组织完整性。我以前做的关节滑膜组织切片,也是最好灌注固定。
...

喔喔~我以前还一直搞不懂,还以为灌流就是做什么组织就在将固定液注射到对应的组织里

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9楼2017-08-19 09:18:05
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michealar

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

是需要固定的,我們在做的時候,取腦的時候就通過心臟灌流,灌注固定然後取腦,取腦後會再固定一夜
10楼2017-10-10 20:41:33
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