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新虫 (初入文坛)

[交流] 进化树的构建已有2人参与

请问一下如何多基因比对

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晋鹏

版主 (知名作家)


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1. 准备序列文件
准备fasta格式序列文件(fasta格式:大于号>后紧跟序列名,换行后是序列。举例如下)。每条序列可以单独为一个文件,也可以把所有序列放在同一文件内。
核酸序列:
>sequence1_name
CCTGGCTCAGGATGAACGCT
氨基酸序列:
>sequence2_name
MQSPINSFKKALAEGRTQIGF
2. 多序列比对
打开MEGA 5,点击Align,选择Edit/Build Alignment,选择Create a new alignment,点击OK。
这时需要选择序列类型,核酸(DNA)或氨基酸(Protein)。
选择之后,在弹出的窗口中直接Ctrl + V粘贴序列(如果所有序列在同一个文件中,即可全选序列,复制)。也可以:点击Edit,选择Insert Sequence From File,选择序列文件(可多选)。
序列文件加载之后,呈蓝色背景(为选中状态)。点击按钮 ,选择Align DNA(如果是氨基酸序列,则会出现Align Protein)。弹出的窗口中设置比对参数,一般都是采用默认参数即可。点击OK,开始多序列比对。
比对完成后,呈现以下状态。
这时需要截齐两端含有---的序列:选中含有---的序列,按键Delete删除(注意:两端都需要截齐)。截齐之后,保存文件为:filename.mas
3. 构建系统进化树
多序列比对窗口,点击Data,选择Phylogenetic Analysis,弹出窗口询问:所用序列是否编码蛋白质,根据实际情况选择Yes或No。此时,多序列比对文件就激活了,可以返回MEGA 5主界面建树了。
MEGA 5主界面。点击Phylogeny,选择Construct/Test Neighbor-Joining Tree…弹出的对话框询问:是否使用当前激活的数据,选择Yes。这时弹出建树参数设置对话框,更改No. of Bootstrap Replications为1000,其他参数默认即可,点击Compute。
这里解释一下,Construct/Test Maximum Likelihood Tree…(ML)或Construct/Test Neighbor-Joining Tree…(NJ)或Construct/Test Minimum-Evolution Tree…(ME)为三种不同的建树方法,NJ方法最常用。
及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-08-17 00:00:09
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18153105568

新虫 (初入文坛)

3楼2017-08-25 13:57:44
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suyouzhen

铁杆木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
多个基因片段的序列比对的方法要看你的最终用途,如果是编码蛋白的基因可以先按氨基酸序列比对,如果不是按核苷酸序列比对。常见的序列比对软件很多,比对效果最差的是Clustal。常见的构建进化树的软件也有很多,比较差的是mega。

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4楼2017-10-01 23:00:19
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