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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助！对基因片段测序结果表示不解，求大神指导
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米夏girl

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 王平阳 at 2017-08-15 16:04:15
你是克隆到载体测序的还是PCR产物直接测序的，克隆到载体上测序一般不会出现这种情况（通用引物测序），PCR产物测序如果正向重叠峰而反向正常，说明产物是单一的，问题在引物上，测序引物在产物上还有高匹配序列，你 ...

我是直接送了PCR产物测序的，因为样品太多了，图省事，就出现了这么好多问题。我是一个小白，不太懂哦~您说的“你可以用正向引物与序列做一个比对”，这一步骤how to 实施呀？求赐教哦~
我的目的片段比较小，大概是300bp左右，如果正向双峰，是不是只用反向序列就可以了呢？
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11楼2017-08-15 16:10:15
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王平阳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
米夏girl: 金币+5, ★★★很有帮助 2017-08-16 10:26:07
对的，这么短，只需要测一个方向就可以了，不需要测定双向，不过测序引物那一端有部分是测不出来的，如果不影响的话
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没有做不到，只有想不到！
12楼2017-08-15 23:13:32
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 米夏girl at 2017-08-15 15:04:57
...

习惯就好，让你多测一次。也有可能他们加样没加好，或者用的是胶回收，然后没回收好。都有可能，建议下回用酶纯化法，不要用胶回收
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13楼2017-08-16 08:41:03
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米夏girl

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 王平阳 at 2017-08-15 23:13:32
对的，这么短，只需要测一个方向就可以了，不需要测定双向，不过测序引物那一端有部分是测不出来的，如果不影响的话

这样呀~明白了，谢谢你！

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14楼2017-08-16 10:25:15
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米夏girl

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by snoopytbw at 2017-08-16 08:41:03
习惯就好，让你多测一次。也有可能他们加样没加好，或者用的是胶回收，然后没回收好。都有可能，建议下回用酶纯化法，不要用胶回收...

这样呀，谢谢你！

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15楼2017-08-16 10:25:27
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salomemao

新虫 (小有名气)
个人感觉还是构建载体比较靠谱，比较片段最后还是要在载体上才能表达，转染等。

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女人一定要有自己的事业
16楼2017-08-16 10:48:07
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bbass533

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
17楼2017-08-16 10:51:27
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zht930528

木虫 (正式写手)

麻辣王子
无信号或信号弱那种 换家公司测
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麻辣王子不爱做实验
18楼2017-08-16 11:14:26
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mhhhwcf059
19楼2017-08-18 03:17:17
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xzffxs384
20楼2017-08-18 03:43:40
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