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法式小面包

铜虫 (小有名气)


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酵母双杂交时杂交效率低怎么解决
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现在进行酵母双杂交实验,进行液体杂交,可是效率很低,prey和bait菌株的投入量是关键吗?每次得到菌体量很大,可就是双倍体很少

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jinkairui123

铁虫 (正式写手)



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不是液体杂交,应该是mating实验吧,mating实验显微镜观察的双倍体的占比在30%以上一般的问题就不大,毕竟样本量大,筛选的相互作用的样本量,初次mating占3成已经很高了,后面的实验通过增加筛选压力淘汰假阳性和弱阳性!
13楼2017-08-14 16:05:59
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法式小面包

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
13楼: Originally posted by jinkairui123 at 2017-08-14 16:05:59
不是液体杂交,应该是mating实验吧,mating实验显微镜观察的双倍体的占比在30%以上一般的问题就不大,毕竟样本量大,筛选的相互作用的样本量,初次mating占3成已经很高了,后面的实验通过增加筛选压力淘汰假阳性和弱 ...

没有镜检,就是稀释100,1000,10000倍涂DDO的平板,结果1000倍稀释,涂100ul的平板长的只有10个左右

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14楼2017-08-15 14:23:01
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法式小面包

铜虫 (小有名气)


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引用回帖:
14楼: Originally posted by 法式小面包 at 2017-08-15 14:23:01
没有镜检,就是稀释100,1000,10000倍涂DDO的平板,结果1000倍稀释,涂100ul的平板长的只有10个左右
...

怎么能提高效率,提高得到的双倍体的量呢?

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15楼2017-08-15 14:24:29
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frankfh2楼
2017-08-14 09:57   回复  
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2017-08-14 09:58   回复  
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cffyau5楼
2017-08-14 09:58   回复  
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2017-08-14 10:04   回复  
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2017-08-14 10:05   回复  
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wulei1478楼
2017-08-14 10:05   回复  
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22231911楼
2017-08-14 10:10   回复  
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dongmings12楼
2017-08-14 10:12   回复  
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