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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酵母双杂交时杂交效率低怎么解决
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法式小面包

铜虫 (小有名气)
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酵母双杂交时杂交效率低怎么解决
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现在进行酵母双杂交实验，进行液体杂交，可是效率很低，prey和bait菌株的投入量是关键吗？每次得到菌体量很大，可就是双倍体很少

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1楼 2017-08-14 09:57:30
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jinkairui123

铁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不是液体杂交，应该是mating实验吧，mating实验显微镜观察的双倍体的占比在30%以上一般的问题就不大，毕竟样本量大，筛选的相互作用的样本量，初次mating占3成已经很高了，后面的实验通过增加筛选压力淘汰假阳性和弱阳性！
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13楼2017-08-14 16:05:59
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法式小面包

铜虫 (小有名气)
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13楼: Originally posted by jinkairui123 at 2017-08-14 16:05:59
不是液体杂交，应该是mating实验吧，mating实验显微镜观察的双倍体的占比在30%以上一般的问题就不大，毕竟样本量大，筛选的相互作用的样本量，初次mating占3成已经很高了，后面的实验通过增加筛选压力淘汰假阳性和弱 ...

没有镜检，就是稀释100,1000,10000倍涂DDO的平板，结果1000倍稀释，涂100ul的平板长的只有10个左右

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法式小面包
14楼2017-08-15 14:23:01
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法式小面包

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by 法式小面包 at 2017-08-15 14:23:01
没有镜检，就是稀释100,1000,10000倍涂DDO的平板，结果1000倍稀释，涂100ul的平板长的只有10个左右
...

怎么能提高效率，提高得到的双倍体的量呢？

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15楼2017-08-15 14:24:29
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frankfh2楼
2017-08-14 09:57   回复  
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小小小虫牙3楼
2017-08-14 09:58   回复  
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小小小虫牙4楼
2017-08-14 09:58   回复  
cffyau5楼
2017-08-14 09:58   回复  
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yishengdish6楼
2017-08-14 10:04   回复  
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太阳当空照87楼
2017-08-14 10:05   回复  
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wulei1478楼
2017-08-14 10:05   回复  
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186292856839楼
2017-08-14 10:09   回复  
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萤火虫之谷10楼
2017-08-14 10:09   回复  
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22231911楼
2017-08-14 10:10   回复  
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dongmings12楼
2017-08-14 10:12   回复  
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