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cat-liujiang

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 求教:GC-MS同位素标记定量 已有1人参与

请教一个问题,看到一篇文献,做的同位素标记前体物饲喂,最后用GC-MS检测同位素标记的代谢物含量
这些化合物的分子量与他们标记的 target ion差别很大
比如第一个化合物分子量是89,3个碳都同位素标记后,应该是92啊,但他的target ion却是221
所有化合物似乎都对不上号,不知道是咋回事儿

Supp. Table 3. Metabolites identified in RCH2 bacterial lysates and their corresponding 13C target ion used for recovery comparison, retention time (RT) and RT of authentic standards. Putative metabolite annotations are indicated by italics (retention time and/or spectra could not be confirmed with an authentic standard).                                        
Compound        13C target ion         Chemical Formula                               
alanine                      221                       C3H7NO2
valine                      220                           C5H11NO2
isoleucine              163                       C6H13NO2
proline                      146                       C5H9NO2
glycine                      249                        C2H5NO2
uracil                       245                      C4H4N2O2
serine                       206                      C3H7NO3

用的是安捷伦的气质
Agilent 7890 gas chromatograph (Agilent Technologies, Santa Clara, CA)
Agilent 5977 single quadrupole mass spectrometer (MS)

http://www.sciencedirect.com/sci ... 71714003502#appsec1
3.5. Microbial metabolite adsorption and recovery
To explore the types of microbial metabolites that adsorb to soil and therefore may represent those that are unavailable to microbes in situ, 13C-labeled RCH2 bacterial lysates were incubated with soil and extracted with water (Fig. 3). K2SO4 (10 mM) was compared to water to determine if this classical extractant was more efficient at metabolite recovery. The most intense peaks from the unlabeled RCH2 lysates (grown with 12C-acetate) were selected for further analysis in labeled samples (compound identification, 13C incorporation and recovery calculations). Spectra from unlabeled RCH2 were compared to labeled cultures, which resulted in the identification of 45 fully-labeled metabolites (Fig. 4, Supp. Table 3). The 13C target ion for each metabolite was quantified for all samples and recovery was calculated. Only 27% of the quantified metabolites showed >50% recovery in the WEOM, with the majority of those being neutral metabolites. All of the polyamine cations identified in this experiment (putrescine, cadaverine, lysine, spermine and spermidine) and most of the anionic metabolites were among those that adsorbed rapidly to soil (Fig. 4). The inclusion of 10 mM K2SO4 as a recovery extractant did not drastically improve or reduce recovery compared to water alone.
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yjjc2012

捐助贵宾 (著名写手)

代谢产物又不是喂食进去的前提,结构完全不一样的

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2楼2017-08-14 11:04:19
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yjjc2012

捐助贵宾 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yjjc2012 at 2017-08-14 11:04:19
代谢产物又不是喂食进去的前提,结构完全不一样的

前体,不是前提

发自小木虫Android客户端
3楼2017-08-14 11:04:59
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cat-liujiang

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yjjc2012 at 2017-08-14 11:04:19
代谢产物又不是喂食进去的前提,结构完全不一样的

可以不管是不是前体饲喂什么的,就看最后检测到的产物,也是不对的啊
比如第一个化合物alanine分子量是89,他的target ion却是221,无法理解
4楼2017-08-14 11:53:41
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yjjc2012

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

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引用回帖:
4楼: Originally posted by cat-liujiang at 2017-08-14 11:53:41
可以不管是不是前体饲喂什么的,就看最后检测到的产物,也是不对的啊
比如第一个化合物alanine分子量是89,他的target ion却是221,无法理解...

转变成其他物质了。All of the polyamine cations identified in this experiment (putrescine, cadaverine, lysine, spermine and spermidine) and most of the anionic metabolites ,,,
5楼2017-08-14 13:15:05
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圆圈爱圈圆

银虫 (职业作家)

您好,我是做微生物13C标记的,请问13C标记的产物可以直接用GC-MS检测吗?GC-MS不是不能检测出同位素的吗??谢谢啦
老师让我用小木虫看文献,而我却来看段子
6楼2017-09-18 09:25:46
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lisiqi190356

新虫 (小有名气)

您好,我是做微生物13C标记的,请问13C标记的产物可以直接用GC-MS检测吗?GC-MS不是不能检测出同位素的吗??谢谢啦
7楼2017-09-18 09:31:27
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yjjc2012

捐助贵宾 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by lisiqi190356 at 2017-09-18 09:31:27
您好,我是做微生物13C标记的,请问13C标记的产物可以直接用GC-MS检测吗?GC-MS不是不能检测出同位素的吗??谢谢啦

gcms测量的是分子量,所以当然可以测出c13 标记的化合物。实际上有的医院就用质谱测定c13标记的二氧化碳(用碳十三标记的尿素让检测者服用,可以测定有无幽门螺杆菌细胞内起催化作用的尿素分解酶)

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8楼2017-09-18 14:53:07
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lisiqi190356

新虫 (小有名气)

9楼2017-09-19 14:55:16
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风过疏竹

金虫 (小有名气)

您好,我是来求助的,想问一下,如果我要定量13c标记抗生素的浓度,该怎么做?

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10楼2017-09-29 15:46:22
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