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叶小宥

新虫 (小有名气)

[求助] 缺氧处理细胞后,cck8检测细胞活力

最近在对细胞进行不同时间的缺氧处理,想检测下,每个时间点的细胞活力,但是老失败。缺氧时间越长,反而吸光度值越大。现在做到分别缺氧处理6h,24h了,测得吸光度值都比对照组大。用96孔板铺的细胞~希望各位前辈指点迷津~~已经做了好长时间了

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小木虫考研

禁虫 (小有名气)

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2楼2017-08-12 16:16:36
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叶小宥

新虫 (小有名气)

看别人也有用MTT,cck8的。不知道为什么会出现这情况??

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3楼2017-08-12 16:47:24
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Ericimb

新虫 (初入文坛)

你的细胞状态怎样,测过增殖动力曲线了嘛?调整生长速率,可以添加低浓度的胎牛血清,并把你的检测时间点放进增殖曲线范围内

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4楼2017-08-14 08:17:59
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simple__plan

木虫 (著名写手)

组织细胞进行无氧呼吸,于是乳酸脱氢酶的含量会增加?文献上怎么解释的?
5楼2017-08-15 16:27:33
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叶小宥

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by simple__plan at 2017-08-15 16:27:33
组织细胞进行无氧呼吸,于是乳酸脱氢酶的含量会增加?文献上怎么解释的?

我觉得缺氧产生的乳酸脱氢酶可能会影响,准备在加入cck之前给细胞换液

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6楼2017-08-16 08:22:35
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叶小宥

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by simple__plan at 2017-08-15 16:27:33
组织细胞进行无氧呼吸,于是乳酸脱氢酶的含量会增加?文献上怎么解释的?

文献上没有很具体怎么做的

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7楼2017-08-16 08:30:51
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simple__plan

木虫 (著名写手)

有一篇文献里是这么说的:细胞凋亡后裂解出的乳酸脱氢酶会很稳定的存在于培养液中。我料想可能是部分脱氢酶的存在与CCK8发生了氧化还原反应。(http://www.dxy.cn/bbs/topic/17932737?onlyHost=1)
要不做个细胞染色看看吧。
8楼2017-08-16 09:38:12
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叶小宥

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Ericimb at 2017-08-14 08:17:59
你的细胞状态怎样,测过增殖动力曲线了嘛?调整生长速率,可以添加低浓度的胎牛血清,并把你的检测时间点放进增殖曲线范围内

没有测过增殖动力曲线,能具体说说怎么做增殖动力曲线吗?也不明白为什么要做这个增殖动力曲线?谢谢啦

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9楼2017-08-16 20:07:52
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