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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 有研究LAMP环介导等温扩增的吗？求指教！
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ice1991

新虫 (小有名气)

[求助] 有研究LAMP环介导等温扩增的吗？求指教！ 已有1人参与

目前在做环介导，可是电泳图并不是文献中那么条带明朗，而且同样的条件，时有时无，在这一块已经花了很多时间了，求助，哪位大神可以指教一下

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1楼 2017-08-11 18:22:53
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木木3952

新虫 (初入文坛)
我也是新手…成像过程有处理好嘛？曝光啥的

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2楼2017-08-18 20:52:53
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ice1991

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 木木3952 at 2017-08-18 20:52:53
我也是新手…成像过程有处理好嘛？曝光啥的

我跑出来的胶没有文献里的那么清晰，不知道怎么回事

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3楼2017-08-19 08:43:04
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喵来了耗子

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可能是你引物设计的问题，引物不太好是会出现这种情况的。而且LAMP扩增很容易出假阳性，加上引物设计不合理会出现非特异性条带。
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ice1991
4楼2017-08-23 14:39:29
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ice1991

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 喵来了耗子 at 2017-08-23 14:39:29
可能是你引物设计的问题，引物不太好是会出现这种情况的。而且LAMP扩增很容易出假阳性，加上引物设计不合理会出现非特异性条带。

温度条件呢？我看文献有的是提前加热后再加入酶跑等温，但是这样就违法不开盖原则了……

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5楼2017-09-13 09:23:03
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喵来了耗子

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by ice1991 at 2017-09-13 09:23:03
温度条件呢？我看文献有的是提前加热后再加入酶跑等温，但是这样就违法不开盖原则了……
...

LAMP加样和检测都最好做到分区操作，有的文献提前加热是不是加了UNG酶做了防污染处理呢？个人觉得是没有必要提前加热再加酶的。温度的话可以自己做一个最适温度的梯度探究，一般就是常规的65度左右吧（很长时间不做了，温度可能记的不太对啊）。
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6楼2017-09-13 16:38:50
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