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xibaohaizi11金虫 (初入文坛)
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[求助]
蛋白质双向凝胶电泳实验问题咨询
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本人最近在做蛋白质双向凝胶电泳实验，下图是几次试验中最好的一次（虽然论文里没法用），这次除上样量过大，IEF过程中发现杂质离子过多，还存在很多问题。求懂行的大侠帮忙解决一下问题所在？不胜感激！！！ 我是用TCA-丙酮法提取的蛋白，IPG strip pH4-7 18cm，蛋白浓度在4.2ug/ul，上样400ul+100ul水化液，平衡液I加0.15gDTT平衡15min，平衡液II加0.375gIAM平衡15min,0.5%的琼脂糖封胶液，考马斯亮兰R-250染色，IEF过程中8000v跑了5h多（42kv多），SDS-PAGE电泳，10mA 1h，30mA 5h。 问题：1，开始的条纹是什么原因？（是平衡有问题？还是胶条与凝胶之间有小气泡的原因？） 2，胶条与凝胶之间有小气泡，尝试多次压胶条，效果都不好，如何赶走气泡？  IMG_20170809_122315.jpg |
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2楼2018-05-21 19:22:09
xibaohaizi11
金虫 (初入文坛)
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- 专业: 植物生理与生化
3楼2018-08-27 09:26:59