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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 包涵体
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ww953017995

新虫 (小有名气)

[交流] 包涵体

基因工程菌表达目的蛋白时出现大量包涵体，怎么才能增加目的蛋白的可溶性表达？

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1楼 2017-08-08 07:44:15
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

hua_geduo

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-09 07:45:16
大肠杆菌表达系统表达量越大越容易形成包涵体，可以尝试低一点的诱导温度，也许会有点帮助但是有限，纯化复性吧，或者尝试用杆状病毒表达
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2楼2017-08-08 12:01:46
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极北小白熊

铁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
就是表达量太高，或者蛋白里含s氨基酸太多，，

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3楼2017-08-08 13:20:53
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1205vivia

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以换几种表达菌株试一下，如rosset等

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4楼2017-08-08 15:30:51
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极北小白熊

铁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by ww953017995 at 2017-08-09 00:50:57
请问有什么好的办法解决吗？增加目的蛋白的可溶性表达。
...

载体，菌株，低温诱导，诱导物浓度，，进行调整就行了，以降低蛋白表达量，，或者就收集包涵体蛋白，然后    变性-复性

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ww953017995
8楼2017-08-09 07:23:39
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ww953017995

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 极北小白熊 at 2017-08-08 13:20:53
就是表达量太高，或者蛋白里含s氨基酸太多，，

请问有什么好的办法解决吗？增加目的蛋白的可溶性表达。

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5楼2017-08-09 00:50:57
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ww953017995

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 1205vivia at 2017-08-08 15:30:51
可以换几种表达菌株试一下，如rosset等

我用的pET28-b载体，BL21宿主细胞。

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6楼2017-08-09 00:52:23
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ww953017995

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hua_geduo at 2017-08-08 12:01:46
大肠杆菌表达系统表达量越大越容易形成包涵体，可以尝试低一点的诱导温度，也许会有点帮助但是有限，纯化复性吧，或者尝试用杆状病毒表达

尝试过，但效果不怎么明显。

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7楼2017-08-09 00:52:58
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ww953017995

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 极北小白熊 at 2017-08-09 07:23:39
载体，菌株，低温诱导，诱导物浓度，，进行调整就行了，以降低蛋白表达量，，或者就收集包涵体蛋白，然后    变性-复性
...

谢谢啦

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9楼2017-08-09 10:53:36
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杨默格

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
10楼2017-08-09 15:46:08
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