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KK小马奔腾

新虫 (小有名气)

[求助] 提取定植在水果上的霉菌RNA 已有1人参与

霉菌定植在水果上,需要提取霉菌RNA,有没有方法将水果和霉菌分离而只得到霉菌的RNA?

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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2017-08-04 07:44:11
将样品表皮祥烂部分去掉,从内部取一小块,分别接种在察氏、PDA培养墓上,做三点点种培养,放入24士2℃培养箱培养1周,将生长的菌种分离,做小培养,涂片鉴定。

按照霉菌的RNA提取方法进行即可。

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及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-08-03 10:30:00
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KK小马奔腾

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-08-03 10:30:00
将样品表皮祥烂部分去掉,从内部取一小块,分别接种在察氏、PDA培养墓上,做三点点种培养,放入24士2℃培养箱培养1周,将生长的菌种分离,做小培养,涂片鉴定。

按照霉菌的RNA提取方法进行即可。

谢谢你的回答,不过实验是要提取霉菌接种在水果上特定时间点时的RNA,所以不能按照这个方法来~

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3楼2017-08-03 10:35:46
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luckydog52

木虫 (著名写手)

直接全部提取了,QPCR的时候设计引物就行了

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自信源于一次次成功的积累
4楼2017-08-03 10:39:30
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KK小马奔腾

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by luckydog52 at 2017-08-03 10:39:30
直接全部提取了,QPCR的时候设计引物就行了

嗯嗯,之前就是这个思路,引物也设计了,结果发现,引物没有特异性,用水果cDNA跑PCR出来好多条带,考虑到后期做实验还要涉及到这个问题,所以想问问在提取之前,能不能有物理的方法分离两种物质?或者两者一起提取之后有没有化学的方法分离?

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5楼2017-08-03 10:49:47
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草溪河

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by KK小马奔腾 at 2017-08-03 10:49:47
嗯嗯,之前就是这个思路,引物也设计了,结果发现,引物没有特异性,用水果cDNA跑PCR出来好多条带,考虑到后期做实验还要涉及到这个问题,所以想问问在提取之前,能不能有物理的方法分离两种物质?或者两者一起提取 ...

理论上应该两个物种间有差异,能设计出特异引物的,多试试。

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6楼2017-08-03 22:58:36
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KK小马奔腾

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 草溪河 at 2017-08-03 22:58:36
理论上应该两个物种间有差异,能设计出特异引物的,多试试。
...

好的,谢谢,我再试试

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7楼2017-08-04 09:28:38
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