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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 用CTAB法提取植物根系真菌
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学生孔

新虫 (小有名气)

[交流] 用CTAB法提取植物根系真菌

我用CTAB法提取植物根系真菌，最后用乙醇洗涤的沉淀颗粒都是黑色的，不是乳白色的，请问大神们这是怎么回事？

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1楼 2017-08-02 21:19:02
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想你的夏季1

新虫 (小有名气)
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是褐色的吧  加了PVP和巯基乙醇么   我也是提真菌的最近在做   方便看下你的CTAB方法么

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2楼2017-08-02 22:02:04
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学生孔

新虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by 想你的夏季1 at 2017-08-02 22:02:04
是褐色的吧  加了PVP和巯基乙醇么   我也是提真菌的最近在做   方便看下你的CTAB方法么

加了巯基乙醇，没有加PVPP。
请问你65度温育一小时离心后，用“酚氯仿异戊醇”抽提了嘛？还是没有这一步，直接“氯仿异戊醇”抽提？？

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3楼2017-08-03 07:23:42
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想你的夏季1

新虫 (小有名气)
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抽提了  有这步   黑的 褐色的  可能是  样本里面的酚被氧化了  或者是你吸上清时太贪心吸入了杂质  还有  巯基乙醇  是要加入到CTAB 一起预热的   然后在加样本

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4楼2017-08-03 08:55:27
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学生孔

新虫 (小有名气)
我是用前将巯基乙醇加到CTAB里的，不过没有预热，研磨的样本就加进去了，再65度温育一小时。你多少度预热多长时间啊？

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5楼2017-08-03 09:00:48
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学生孔

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 学生孔 at 2017-08-03 07:23:42
加了巯基乙醇，没有加PVPP。
请问你65度温育一小时离心后，用“酚氯仿异戊醇”抽提了嘛？还是没有这一步，直接“氯仿异戊醇”抽提？？
...

你加PVPP了嘛？我之前试过，可PVPP不溶，后来就没用过。

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6楼2017-08-03 09:04:20
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想你的夏季1

新虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by 学生孔 at 2017-08-03 09:04:20
你加PVPP了嘛？我之前试过，可PVPP不溶，后来就没用过。
...

PVP 不融？  怎么可能   加热溶解 的

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7楼2017-08-03 09:06:44
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想你的夏季1

新虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by 学生孔 at 2017-08-03 09:04:20
你加PVPP了嘛？我之前试过，可PVPP不溶，后来就没用过。
...

加了试一下  别纠结了   多做几次就出来了

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8楼2017-08-03 09:08:45
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学生孔

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 想你的夏季1 at 2017-08-03 09:06:44
PVP 不融？  怎么可能   加热溶解 的
...

PVP和PVPP是一种吗？我的加热溶解后一段时间又沉淀了？

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9楼2017-08-03 09:11:36
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想你的夏季1

新虫 (小有名气)
是一种  我懒得打。。。  你的CTAB发 的母液要调PH的   你再查查资料看看你试剂配对了没有

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10楼2017-08-03 09:13:18
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