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[求助]
关于菌体破碎后分离上清及沉淀,用多少转速合理?并且应用较广?
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采用蛋白为包涵体表达目的蛋白,跑电泳上清无目的条带。 先要收集破碎后沉淀,可是0.5g的菌加1mLbuffer 超声破碎1s停1s,收集12000rpm*10min后, 分为上清,浊液,和沉淀,并且倾斜取上清,沉淀不实依旧流动,我现在可以做哪些改进呢? 我想要沉淀,感觉暂时分不开。 离心机最大转速13000rpm,求指导。 并且破碎后管壁上有黑黑的一圈,那是什么呢? |
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