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钱塘幼麟

木虫 (著名写手)

[求助] 怎样鉴别蛋白质(受体)是否发生了二聚化,有哪些方法? 已有2人参与

如题

想鉴别蛋白质(GPCR,位于细胞表面)是否发生了二聚化,有哪些方法?各有什么特点和优缺点?谢谢!
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
钱塘幼麟: 金币+15, ★★★很有帮助 2017-08-04 11:48:44
一般用体外纯化的蛋白走gel filtration
2楼2017-08-02 01:06:18
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钱塘幼麟

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-08-02 01:06:18
一般用体外纯化的蛋白走gel filtration

能不能仔细讲讲,谢谢!
3楼2017-08-02 17:02:28
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 钱塘幼麟 at 2017-08-02 17:02:28
能不能仔细讲讲,谢谢!...

纯化蛋白,然后跑柱层析,如果形成dimer会有分子量大小的变化,具体步骤请Google
4楼2017-08-03 00:16:01
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钱塘幼麟

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-08-03 00:16:01
纯化蛋白,然后跑柱层析,如果形成dimer会有分子量大小的变化,具体步骤请Google...

但是我这个GPCR是膜蛋白,这个方法貌似不行。
5楼2017-08-04 11:46:50
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biotpack2

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以在蛋白样品中不SDS 和疏基乙醇等变性剂,保持蛋白二聚化的自然形态,再跑非变性电泳测出蛋白的分子量大小,再与在变性情况下测出的蛋白分子量做比较,就能够知道蛋白是否发生了二聚化。分子筛层析也能够检测蛋白是否发生二聚化。
6楼2017-08-04 13:52:31
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钱塘幼麟

木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by biotpack2 at 2017-08-04 13:52:31
可以在蛋白样品中不SDS 和疏基乙醇等变性剂,保持蛋白二聚化的自然形态,再跑非变性电泳测出蛋白的分子量大小,再与在变性情况下测出的蛋白分子量做比较,就能够知道蛋白是否发生了二聚化。分子筛层析也能够检测蛋白 ...

请问膜蛋白可行吗?

发自小木虫IOS客户端
7楼2017-08-05 02:47:20
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8楼2017-08-19 11:57:32
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