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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 资料求助 » 购买的杂交瘤细胞状态不好
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贾克斯JAX

新虫 (初入文坛)

[求助] 购买的杂交瘤细胞状态不好 已有1人参与

从别的公司买的杂交瘤细胞复苏后，当时活率挺高的，在过了一天去传代的时候，有好多细胞飘起来了，本应该是半贴壁的，我用的培养基是高糖DMEM+15%胎牛血清，没有再加其他任何东西，是不是还需要添加其他东西，或者我的操作有问题，有没有人可以帮助我一下

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1楼 2017-08-01 13:13:09
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ywwabc

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1、先按原来的HT补加HT，在满满去除
2、补加谷氨酰胺
3、漂的细胞洗去，只留贴壁的，半量换液
4、细胞密度不要大于80%,低于30%
5、补加滋养层
建议在96或24孔板铺滋养层后提高细胞密度培养
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3楼2017-08-09 15:13:20
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贾克斯JAX

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 贾克斯JAX at 2017-08-01 13:13:09
从别的公司买的杂交瘤细胞复苏后，当时活率挺高的，在过了一天去传代的时候，有好多细胞飘起来了，本应该是半贴壁的，我用的培养基是高糖DMEM+15%胎牛血清，没有再加其他任何东西，是不是还需要添加其他东西，或者我 ...

现在细胞的活率只有30%多了，还有杂交瘤细胞到什么状态了才能去传代，希望能得到大家的帮助

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2楼2017-08-01 13:15:11
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ywwabc

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
贾克斯JAX: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢您的分享 2017-08-12 06:45:19
引用回帖:
3楼: Originally posted by ywwabc at 2017-08-09 15:13:20
1、先按原来的HT补加HT，在满满去除
2、补加谷氨酰胺
3、漂的细胞洗去，只留贴壁的，半量换液
4、细胞密度不要大于80%,低于30%
5、补加滋养层
建议在96或24孔板铺滋养层后提高细胞密度培养

先按原来的HT浓度补加HT，再慢慢降低去除
2、补加谷氨酰胺
3、漂的细胞洗去，只留贴壁的，半量换液
4、细胞密度不要大于80%,低于30%
5、补加滋养层
建议在96或24孔板铺滋养层后提高细胞密度培养
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4楼2017-08-09 15:14:31
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