24小时热门版块排行榜

返回列表

王木木2016

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 520
散金: 14
帖子: 124
在线: 23.7小时
虫号: 4568359
注册: 2016-04-05
性别: MM
专业: 生物化学

[求助] 蛋白诱导已有2人参与

我诱导的蛋白，之前做实验是在包涵体中，这几天再做实验发现转移到上清液中了，请问大家是什么原因啊，上清中的目的蛋白可以用吗？

发自小木虫Android客户端

回复此楼

» 猜你喜欢

1楼 2017-07-28 09:47:04

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

科学小覃

木虫 (正式写手)

应助: 43 (小学生)
金币: 2426.9
散金: 100
红花: 8
帖子: 725
在线: 86.1小时
虫号: 3126634
注册: 2014-04-10
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

这么神奇，我想要的是可溶表达。能不能说说你是怎么做到的，

赞一下

回复此楼

生物科学

2楼2017-07-28 10:15:28

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

晋鹏

版主 (知名作家)

MolEPI: 6
应助: 626 (博士)
贵宾: 0.096
金币: 27590.2
散金: 1052
红花: 288
沙发: 2
帖子: 5663
在线: 726.4小时
虫号: 1183978
注册: 2011-01-05
性别: GG
专业: 生物信息学
管辖: 农林

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+4, 鼓励回帖交流 2017-07-29 12:05:41

目的蛋白能同时存在于上清和包涵体中
1）你应该是没有明白什么是包涵体,简单的说就是翻译的蛋白没有正确折叠而聚集在一起形成的,主要的是疏水作用.实际上就是很多个蛋白分子,这些蛋白并不是交联在一起的,用高浓度的尿素和盐酸胍可以使他们变性,解聚.
2）用沉淀跑电泳可以确定目的蛋白是否在包涵体?
包涵体是不溶于水的,比较总蛋白.沉淀,及上清中的诱导带就可以知道上清中有没有你想要的可溶蛋白了
3）电泳检测的话,可以用SDS-PAGE检测,在上样之前,需要用上样缓冲液处理样品,处理后,包涵体也就解聚了,每个蛋白分子与SDS结合,形成了可溶物.

赞一下(1人)

回复此楼

及时行乐，人生不留遗憾！

3楼2017-07-28 10:41:24

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

王木木2016

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 520
散金: 14
帖子: 124
在线: 23.7小时
虫号: 4568359
注册: 2016-04-05
性别: MM
专业: 生物化学

引用回帖:

3楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-28 10:41:24
目的蛋白能同时存在于上清和包涵体中
1）你应该是没有明白什么是包涵体,简单的说就是翻译的蛋白没有正确折叠而聚集在一起形成的,主要的是疏水作用.实际上就是很多个蛋白分子,这些蛋白并不是交联在一起的,用高浓度的 ...

可是之前都是在沉淀中的啊，现在在上清中了，对蛋白没有影响吧？正常纯化就可以么

发自小木虫Android客户端

赞一下

回复此楼

4楼2017-07-28 13:05:47

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖