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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 光谱分析 » 紫外分光光度计的使用，标准曲线总做不出来，换了仪器也不准，求大神指点
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饶花花

新虫 (初入文坛)

[求助] 紫外分光光度计的使用，标准曲线总做不出来，换了仪器也不准，求大神指点 已有2人参与

求大神指点紫外分光光度计使用，标准曲线制作过程中的容易出问题的步骤，做了几次都不行，找不到原因，换了新仪器R值也做不出3个9。我用的是苯酚硫酸法测多糖，苯酚必须当天用，当天配吗这一类的小细节求大神细说，拜托了。
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1楼 2017-07-27 15:38:35
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yc080513

新虫 (小有名气)
可以换一种溶液做标曲试试，如果能做出0.999则可以排除仪器的问题。

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2楼2017-07-27 18:20:08
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小胖胖

新虫 (小有名气)
1浓度设置六个或七个 最终选择其中连续的五个 2每个浓度最好设置三个平行组 3从高浓度母液吸取不同体积的液体定容到相同体积 4浓度范围设置大点，设置等差

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7楼2017-07-30 10:16:43
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伽利不能略

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

苯酚易被氧化，溶液里加入维C抗氧化试试，再测下溶液稳定性
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10楼2017-08-01 15:13:00
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

这个操作确实有点难，而且手工过程比较多，真的很难得到高精度。你做到995，足够了。除非有特定要求，需要搞得很精密，才刻意追求999. 只要仪器稳定性好，足矣。
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13楼2017-08-18 09:37:58
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千牛之子

新虫 (初入文坛)
加班做对比实验，肯定有999

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3楼2017-07-27 20:01:49
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饶花花

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yc080513 at 2017-07-27 18:20:08
可以换一种溶液做标曲试试，如果能做出0.999则可以排除仪器的问题。

如果我用样品做了六个小时的重复性实验，每隔一个小时就测一次，测出来的数值越来越变小又是什么问题呢
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4楼2017-07-29 08:55:36
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饶花花

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 千牛之子 at 2017-07-27 20:01:49
加班做对比实验，肯定有999

我已经做了六次标准曲线了，想到了各种误差问题，包括加样的误差问题，
1.刚开始用的移液枪，后面又改用移液管，最多做到995，
2.还以为是天气热得原因，搬去了有空调的地方，
能想到的都想了，做出来还是不到999
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5楼2017-07-29 08:59:00
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yc080513

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 饶花花 at 2017-07-29 08:55:36
如果我用样品做了六个小时的重复性实验，每隔一个小时就测一次，测出来的数值越来越变小又是什么问题呢...

有可能你的标液浓度太高了，后阶段根本就不成线性，你可以降低溶液浓度或者用二元线性拟合试一试。

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6楼2017-07-29 09:15:11
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饶花花

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yc080513 at 2017-07-29 09:15:11
有可能你的标液浓度太高了，后阶段根本就不成线性，你可以降低溶液浓度或者用二元线性拟合试一试。
...

我的标液浓度改动过了已经做过了调整，高了调低了，还是不行，我在想是不是硫酸苯酚法硫酸会发热，在配置过程中我没考虑这个问题？
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8楼2017-07-30 11:18:36
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故乡的旧风景

新虫 (初入文坛)
样品不稳定，容易变质，不要放置对光敏感，

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9楼2017-07-30 14:27:20
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