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luruixia

新虫 (正式写手)

[交流] 请教:HPLC流动相平衡问题

常规C18分析柱,5um,4.6×150mm,流动相为5mM 磷酸/水:5mM磷酸/85%甲醇/水=4:6,流速:1mL/min;平衡了近1.5小时,基线还是大起大落,求教:是我的流动相的配比有问题吗?
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caidelingkitty

木虫 (著名写手)


jsys(金币+1):感谢应助!
你的流动相的配比是什么啊?
怎么看上去那么繁琐?
不就是甲醇:酸水=????????对吧?
一般加酸的比例不会很大,只是微调。
茶的哲学
2楼2009-02-03 21:21:03
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luruixia

新虫 (正式写手)

确实就是甲醇和酸水的混合液,请教我的磷酸浓度或比例是不是有些高?
3楼2009-02-03 21:36:52
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dongrong29

银虫 (小有名气)


jsys(金币+1):感谢应助!
5mM的磷酸溶液浓度不算高
还是看一下硬件的问题
建议:流动相换为纯甲醇看看基线是否平
Goodgoodstudy,daydayup!
4楼2009-02-03 21:49:01
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通


jsys(金币+1):感谢应助!
什么检测器?
七窍通了六窍
5楼2009-02-04 08:29:32
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曾展文

至尊木虫 (著名写手)


jsys(金币+1):感谢应助!
先用纯甲醇以1.5ml/min的流速运行几分钟,待基线平稳后换上流动相
6楼2009-02-04 09:11:37
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uliya809

木虫 (正式写手)


jsys(金币+1):感谢应助!
检测波长看看有没有问题,不能再200左右
7楼2009-02-05 08:24:07
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swt1898

铁虫 (著名写手)


jsys(金币+1):感谢应助!
有可能是柱子没有连接好,也有可能是你选择的波长不合适,很多国产的试剂在该波长下有吸收,改变一下波长就可以啦
8楼2009-02-05 08:48:01
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luruixia

新虫 (正式写手)

多谢大家的帮助!
9楼2009-02-05 17:07:12
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嘉木

金虫 (正式写手)


jsys(金币+1,VIP+0):感谢应助 2-19 16:17
波长你调在200~220之间了吧
调大一点试试
10楼2009-02-19 14:24:12
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