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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 请教：HPLC流动相平衡问题
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luruixia

新虫 (正式写手)

[交流] 请教：HPLC流动相平衡问题

常规C18分析柱，5um,4.6×150mm,流动相为5mM 磷酸/水:5mM磷酸/85％甲醇/水＝4：6，流速：1mL/min;平衡了近1.5小时，基线还是大起大落，求教：是我的流动相的配比有问题吗？
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1楼 2009-02-03 21:16:01
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caidelingkitty

木虫 (著名写手)
★
jsys(金币+1):感谢应助！
你的流动相的配比是什么啊？
怎么看上去那么繁琐？
不就是甲醇：酸水=????????对吧？
一般加酸的比例不会很大，只是微调。
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茶的哲学
2楼2009-02-03 21:21:03
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luruixia

新虫 (正式写手)
确实就是甲醇和酸水的混合液，请教我的磷酸浓度或比例是不是有些高？
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3楼2009-02-03 21:36:52
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dongrong29

银虫 (小有名气)
★
jsys(金币+1):感谢应助！
5mM的磷酸溶液浓度不算高
还是看一下硬件的问题
建议：流动相换为纯甲醇看看基线是否平
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Goodgoodstudy,daydayup!
4楼2009-02-03 21:49:01
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通
★
jsys(金币+1):感谢应助！
什么检测器？
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七窍通了六窍
5楼2009-02-04 08:29:32
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曾展文

至尊木虫 (著名写手)
★
jsys(金币+1):感谢应助！
先用纯甲醇以1.5ml/min的流速运行几分钟，待基线平稳后换上流动相
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6楼2009-02-04 09:11:37
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uliya809

木虫 (正式写手)
★
jsys(金币+1):感谢应助！
检测波长看看有没有问题，不能再200左右
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7楼2009-02-05 08:24:07
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swt1898

铁虫 (著名写手)
★
jsys(金币+1):感谢应助！
有可能是柱子没有连接好，也有可能是你选择的波长不合适，很多国产的试剂在该波长下有吸收，改变一下波长就可以啦
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8楼2009-02-05 08:48:01
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luruixia

新虫 (正式写手)
多谢大家的帮助！
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9楼2009-02-05 17:07:12
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嘉木

金虫 (正式写手)
★
jsys(金币+1,VIP+0):感谢应助 2-19 16:17
波长你调在200~220之间了吧
调大一点试试
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10楼2009-02-19 14:24:12
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