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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 测定巯基含量
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13122327737

新虫 (初入文坛)

[求助] 测定巯基含量 已有4人参与

测肌原纤维蛋白巯基含量时，配制pH为6.8，0.2mol/L 的Tris-HCl缓冲液试剂：含8mol/L尿素，0.02 SDS，10mmol/L EDTA，0.6mol/L KCl,其中EDTA不溶怎么办？试了新的EDTA还是不溶，有配过相同试剂的吗？（百度说EDTA难溶于水，易溶于氨溶液，Tris就是氨溶液啊，不知道各位大神有什么解决办法吗？）
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1楼 2017-07-26 13:31:26
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回帖置顶 ( 共有1个 )

13122327737

新虫 (初入文坛)
13122327737: 回帖置顶 2017-07-31 16:40:46
引用回帖:
7楼: Originally posted by hldj1964 at 2017-07-27 17:41:14
要水溶解合格的那种。
...

老师您好，我想问一下在哪里能买到这种水溶解合格的EDTA呢？国药上没有卖的啊。问了其他的生物公司，也都是碱溶的
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9楼2017-07-28 18:08:57
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普通回帖

晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、巯基试剂(巯基含量测定)巯基试剂: DTNB0.297g,盐酸胍 0.086g,EDTA 0.056g,用 0.1mol/L PBS 试剂溶解并定容至 500mL。

2、pH值为4.5时,4,4'-二吡啶基二硫(4,4'-dithiodipyridine,DTDP)与巯基化合物反应,生成4-硫代吡啶酮,在波长324 nm处有最大吸收,通过测定反应产物的吸光度值计算巯基含量。
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及时行乐，人生不留遗憾！
2楼2017-07-26 16:39:30
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hldj1964

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试了新的EDTA还是不溶,你要买试剂瓶上指标一栏有溶解澄清试验合格的。没有的不能买。
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从事科研工作数载，现已退休，有一些经验可以奉献给年轻人，但电脑水平不佳，还需学习。
3楼2017-07-27 07:59:23
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13122327737

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hldj1964 at 2017-07-27 07:59:23
试了新的EDTA还是不溶,你要买试剂瓶上指标一栏有溶解澄清试验合格的。没有的不能买。

好的  谢谢
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4楼2017-07-27 11:52:08
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13122327737

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-26 16:39:30
1、巯基试剂(巯基含量测定)巯基试剂: DTNB0.297g,盐酸胍 0.086g,EDTA 0.056g,用 0.1mol/L PBS 试剂溶解并定容至 500mL。

2、pH值为4.5时,4,4'-二吡啶基二硫(4,4'-dithiodipyridine,DTDP)与巯基化合物反应,生成4- ...

谢谢您的回复  但是我不想换试剂  因为实验室之前就是用这种方法测得  我想知道是哪里出了问题
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5楼2017-07-27 11:53:22
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13122327737

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hldj1964 at 2017-07-27 07:59:23
试了新的EDTA还是不溶,你要买试剂瓶上指标一栏有溶解澄清试验合格的。没有的不能买。

我这上面标记的是碳酸钠溶解实验 合格  但是我不是用碳酸钠来溶的  那应该买哪种EDTA呢
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6楼2017-07-27 12:12:58
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hldj1964

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 13122327737 at 2017-07-27 12:12:58
我这上面标记的是碳酸钠溶解实验 合格  但是我不是用碳酸钠来溶的  那应该买哪种EDTA呢...

要水溶解合格的那种。

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从事科研工作数载，现已退休，有一些经验可以奉献给年轻人，但电脑水平不佳，还需学习。
7楼2017-07-27 17:41:14
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13122327737

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by hldj1964 at 2017-07-27 17:41:14
要水溶解合格的那种。
...

好的谢谢
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8楼2017-07-27 21:19:19
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

只能加热直接溶解了。如果直接用EDTA加入Tris里面，加热，还是不溶解。那考虑是否换二钠盐
确定一下，你们实验室之前用的是EDTA还是EDTA二钠，
这两个试剂溶解性差别很大的。
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10楼2017-07-31 20:19:38
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