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风之翼HWX

新虫 (初入文坛)

[求助] 层析柱再生过程中产生很多气泡 已有2人参与

各位高手,我现在用填料Q  sepharose FF 分离蛋白,现在碰到很头痛的问题是,每次装柱的时候没有气泡产生,样品上样、平衡、洗脱都没有气泡,但是每次用NaOH 再生的时候,柱子缓冲部位都会产生很多小气泡,柱子重装了几次还是没有好转,不知道怎么回事望各位大神指点迷津。谢谢!
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

赞同2楼,还有就是所有缓冲液和柱子的温度要保持一致,缓冲液都做脱气处理,可以抽真空。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2017-08-08 10:47:59
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walking dead

金虫 (小有名气)

填料制备和蛋白纯化专家


【答案】应助回帖

严格的,你把缓冲液和样品都最好做脱气处理。另外后面再生的氢氧化钠溶液也一样做脱气处理,还有就是你洗脱后柱子不能干,否则也会有气泡。希望对你有所帮助。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2017-08-01 11:40:40
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风之翼HWX

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by walking dead at 2017-08-01 11:40:40
严格的,你把缓冲液和样品都最好做脱气处理。另外后面再生的氢氧化钠溶液也一样做脱气处理,还有就是你洗脱后柱子不能干,否则也会有气泡。希望对你有所帮助。

谢谢!!!
3楼2017-08-07 08:10:20
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风之翼HWX

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by hc-material at 2017-08-08 10:47:59
赞同2楼,还有就是所有缓冲液和柱子的温度要保持一致,缓冲液都做脱气处理,可以抽真空。

谢谢回复
5楼2017-08-18 13:53:49
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