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guo_ahu

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 微米级聚苯乙烯微球在用于免疫分析时候,非特异性吸附如何降低

1. 10 微米羧基化聚苯乙烯微球,通过EDC/NHS反应包被上链酶亲和素,之后,利用链酶亲和素与生物素特异性结合,标记上了生物素化的捕获抗体。然后,用BSA封闭。
2. 设置对照组,加或不加抗原,37度水浴反应45分钟。
3. 加入包被了检测抗体的1微米的磁球。37度水浴反应45分钟。
4. 检测,两组结果没有明显差别。

怀疑是非特异性吸附,不知是否?请大家多多指教。
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lessons1

新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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guo_ahu: 金币+10 2017-07-24 15:47:16
是不是抗体对有问题?
2楼2017-07-23 11:12:25
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是双抗体夹心法吗?

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-07-29 16:22:43
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guo_ahu

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yubeihong at 2017-07-29 16:22:43
是双抗体夹心法吗?

是的。双抗夹心法。请问您知道原因吗
4楼2017-07-29 18:11:28
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
两组结果没有差别是什么结果没差别?

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-07-29 20:15:24
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guo_ahu

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by yubeihong at 2017-07-29 20:15:24
两组结果没有差别是什么结果没差别?

电化学检测结果。请问您知道原因吗
6楼2017-07-30 14:09:12
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xrr1988

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
guo_ahu: 金币+5 2017-08-26 10:58:28
首先,如果双抗体夹心法,测抗原
第一步磁珠-SA封闭后,加biotin-包被抗体,加抗原,再加标记物-标记抗体才能连起来一条链,
不清楚楼主你最后的加微球-抗体是干嘛的
7楼2017-08-07 12:26:32
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guo_ahu

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by xrr1988 at 2017-08-07 12:26:32
首先,如果双抗体夹心法,测抗原
第一步磁珠-SA封闭后,加biotin-包被抗体,加抗原,再加标记物-标记抗体才能连起来一条链,
不清楚楼主你最后的加微球-抗体是干嘛的

你好。我加的微球-抗体是作为检测信号的,微球中包了信号分子。不知道实验体系出了什么问题,就是不work
8楼2017-08-26 10:58:20
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1974707632

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
感觉是你的检测微球不工作
9楼2018-04-27 22:43:58
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shangdugirl

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问你 亲和素 是固定相?固定在哪?
10楼2018-07-13 10:01:58
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