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yangjian8411

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[交流] AFLP预扩增和选择性扩增琼脂糖图片，不知是否正常

最近做AFLP实验，直接做大槽子跑聚丙烯胶，老是跑不出来，所以就用琼脂糖跑了一下，预扩增看起来还行，是呈片段状，而选择性扩增就是呈连续弥散状态，不知正常与否，请各位大虾指点！

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-19 at 12:39 ]

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1楼 2009-02-01 14:58:30

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yangjian8411

应助: (幼儿园)
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虫号: 507535

上图是预扩增，下图为选择性扩增条带

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2楼2009-02-01 14:59:17

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yangjian8411

应助: (幼儿园)
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虫号: 507535

不对，反了，上图是选择性扩增，下图为预扩增

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3楼2009-02-01 14:59:55

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cnliu51

金虫 (小有名气)

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专业: 水产生物遗传育种学

★
lwf991229(金币+1):感谢参与讨论,欢迎常来生物版~ 2-3 13:22

看这种图必须有marker，预扩产物应在500bp上下都有分布才算正常。

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4楼2009-02-02 06:20:06

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yony001

新虫 (初入文坛)

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帖子: 20
在线: 10.3小时
虫号: 459799
注册: 2007-11-15
专业: 生命科学

应该差不多

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5楼2009-02-13 10:23:56

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tuziluojie

银虫 (小有名气)

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专业: 生物化学

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):鼓励新虫~ 2-16 10:25

预扩产物要在500bp左右，选扩我没用琼脂糖跑过，你可以用小板聚丙烯检测一下。pcr体系挺重要的，做梯度试一下吧，我当初摸索很久呢。

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6楼2009-02-15 14:38:20

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jiangli3182

金虫 (小有名气)

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性别: MM
专业: 生物科学

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论，欢迎常来~ 2-16 10:26

如果预扩增正常，选择弥散是选择的体系中模板量太多了。要稀释10倍，或是以20微升体系来说只要0.2-0.5微升

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7楼2009-02-16 09:32:21

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