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荷岚102

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌液PCR一直做不出来 已有1人参与

第一张图是我克隆片段的电泳结果,然后我做了胶回收,连接到T载体上,转化后的菌斑做PCR,一直都是第二张图片的情况,只有正对照有目的条带,菌斑PCR之后电泳,点样孔是亮的,而且在100bp左右有亮团
我重复做了四次,总是这样的结果,求各位大神指点

菌液PCR一直做不出来


菌液PCR一直做不出来-1


发自小木虫Android客户端
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玉雪晴儿

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
菌液PCR本身准确性不高,建议直接小提质粒进行酶切鉴定,如果酶切鉴定也不正确,那就需要从源头找原因,是否没有转化成功或者没有连接成功;如果可以酶切鉴定成功,那可以直接拿去测序了,菌液PCR不成功很可能就是PCR体系、程序等各方面出的问题了。
沿着既定的方向,前进
2楼2017-07-20 11:19:37
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