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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 菌液PCR一直做不出来
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荷岚102

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌液PCR一直做不出来 已有1人参与

第一张图是我克隆片段的电泳结果，然后我做了胶回收，连接到T载体上，转化后的菌斑做PCR，一直都是第二张图片的情况，只有正对照有目的条带，菌斑PCR之后电泳，点样孔是亮的，而且在100bp左右有亮团
我重复做了四次，总是这样的结果，求各位大神指点

菌液PCR一直做不出来


菌液PCR一直做不出来-1


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1楼 2017-07-19 20:04:29
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玉雪晴儿

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌液PCR本身准确性不高，建议直接小提质粒进行酶切鉴定，如果酶切鉴定也不正确，那就需要从源头找原因，是否没有转化成功或者没有连接成功；如果可以酶切鉴定成功，那可以直接拿去测序了，菌液PCR不成功很可能就是PCR体系、程序等各方面出的问题了。
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沿着既定的方向，前进
2楼2017-07-20 11:19:37
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