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[求助]
大鼠肝微粒体实验问题求助。谢谢大家不吝赐教哦!
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请问哪位同学做过大鼠肝微粒体实验,有问题请教: 1. 肝微粒体制备中,大鼠怎么处死,可以麻醉吗?会对后续代谢实验有影响吗? 断头怎么做呢,不敢下手啊!肝脏必须要灌流吗? 2. 缓冲液在文献中用的各不相同,Tris-HCl缓冲液,0.25mol/L蔗糖溶液还有PBS各种,那种更常用呢? 10 mmol Tris 1.2114g 250 mmol 蔗糖 85.572g 1 mmol EDTA 0.37224g 盐酸( HCl)调节 pH 为 7.4 我用这个配方的缓冲液匀浆,重悬微粒体可以吗? 3. 冻存微粒体要加20%甘油吗?那最后用的时候是直接用吗?甘油没有影响? 因为从来没有接触过这个实验,完全不懂。有哪位好心的同学熟悉这类实验呢,能不能留个联系方式,私信也行。所里也没有人做过,请各位大神不吝赐教!谢谢啦 |
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