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求助，TCA丙酮沉淀蛋白的具体步骤 发自小木虫Android客户端 |
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zhouxfd
木虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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Acetone precipitation 1. Add same volume of 20% TCA (in water). 2. Place on ice for at least 1 hour. 3. Add 4 volume of 100% cold acetone (-20℃) into your protein solution. 4. Mix well and put it in -20℃ freezer overnight (or -80℃ freezer for at least 1 hour) 5. Collect precipitate by centrifugation (20min, max speed-at least 20,000 × g, 4C). 6. Wash the pellet with 1 ml of ice-cold 80% acetone (-20℃ freezer, overnight). 7. Repeat step 4 twice [total thrice wash]. Completely resuspend the pellet each time with vigorous vortex. Do not overdry it out. I usually place proteins for 7 min 30 sec. with the -20℃ block. |
2楼2017-07-19 00:44:45
3楼2017-07-19 23:56:42
4楼2017-12-01 11:06:18