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啤酒alep

新虫 (初入文坛)

[求助] 提取植物叶片Dna上清黏稠怎么回事 已有2人参与

我提取植物叶片DNA ,抽提以后的上清依然黏稠是怎么回事呀,我明明加了pvp 的,最后得出的结果也不好,260/230都不到1,有知道怎么解决的吗

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傲娇小丫头

新虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-17 23:20:21
植物叶片含有多糖多酚,用CTAB裂解前,应该用缓冲液漂洗,在进行裂解

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一万年太久,只争朝夕。。。。。
2楼2017-07-17 23:19:09
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2017-07-18 07:45:46
1、不知道你提取的是什么植物,不过用酚氯仿方法提基因组DNA有颜色是很正常的事。 首先,肯定不是蛋白质被吸上来了,你不放心可以少吸一点上清。由于某些植物中富含多酚多糖类物质,当从细胞中分离出来很容易氧化而转变成溶于水相的有颜色的成分。

2、最可能的一个原因 是DNA浓度过大(DNA是长链分子 粘稠是正常的。) 你可以通过紫外扫描检测,一方面看看纯度如何(260nm有没有吸收峰,与280nm的od 比值?),另一方面计算一下其浓度就知道了是不是这个原因。


3、此外 可能蛋白质没有沉淀完全,在以上紫外检测中也可知道的。如不纯,可加入氯仿异戊醇再重复变性蛋白以纯化之。
及时行乐,人生不留遗憾!
3楼2017-07-17 23:40:54
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-18 07:46:04
应该是多糖,用试剂盒提取可能会好一些吧
4楼2017-07-18 01:04:49
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5楼2017-08-19 09:16:10
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6楼2017-08-21 07:44:42
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myh1205

新虫 (初入文坛)

7楼2017-10-16 19:53:56
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