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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于转化后长菌少的烦恼
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玉雪晴儿

银虫 (正式写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-07-20 15:07:20
如何验证连接效率，有什么好办法吗...

可跑胶看条带。也可分别用不同的连接酶，连接时间可以长一些再重复试验。不过我看你是电击转化，大肠的转化其实热激法效率就很好
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21楼2017-07-21 08:49:22
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匿名

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22楼2017-07-21 09:33:19
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玉雪晴儿

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
22楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-07-21 09:33:19
说实话，我已经做了很久了，能试的我都试了，感受态做了5次了，还害怕表达蛋白对菌有毒害作用，换了菌株，连接酶买了三次，我觉得是不是命呀。...

那你直接买无缝连接试剂盒回来做吧，连接效率好，节省时间
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23楼2017-07-21 10:29:24
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匿名

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24楼2017-07-21 11:29:03
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25楼2017-07-21 13:24:48
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26楼2017-07-21 14:18:58
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玉雪晴儿

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
guoxhyy: 金币+3 2017-07-21 17:35:06
引用回帖:
24楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-07-21 11:29:03
好用吗？之前没用过，哪个牌子比较好用。...

这个技术已经很成熟了，TAKARA或者BioLab的试剂盒都很不错，就是价格稍微贵一点，国产的效率也不错，比如ABM。这种技术对操作严密性要求比较高，你慢慢琢磨吧
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27楼2017-07-21 17:30:35
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匿名

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28楼2017-07-21 17:35:18
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uunpyqs624
29楼2017-08-20 02:06:38
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江灵敏

新虫 (小有名气)
我做T 载体连接，做转化，有很多菌，蓝白斑也很明显，但是我挑了很多菌去提质粒，什么都没有，质粒都没有。？？？

发自小木虫Android客户端
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30楼2017-08-20 12:03:25
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