| 查看: 1365 | 回复: 6 | |||
jxWire新虫 (初入文坛)
|
[交流]
枯草芽胞杆菌的转化表达相关问题
|
|
本人最近在做枯草的转化表达实验，用的穿梭载体，遇到很多问题，希望大家有这方面实验经验的可以指导我，帮我解决下问题，谢谢大家 实验中遇到的问题是这样的： 1.重组质粒构建成功了 在大肠中复制是没有问题的 提出的质粒酶切 测序鉴定结果都对，但是转化进枯草以后 一方面提不出质粒 另一方面菌落PCR测序的结果跟我的目的片段不一致 这个是连接出的问题还是菌的问题或者是其他的呢 2.还有提质粒的问题 用的TAKARA家的革兰式阳性小提试剂盒 但是发现阴性对照的空菌也能提出一个条带 （分子量在10000+） 并且转化完的菌提不出我的重组质粒 想知道这个是我转化的原因 还是试剂盒的原因呢 大家在做这个实验的时候有遇到过这种问题吗 如果是试剂盒的原因的话 可以推荐我几个好用的牌子吗 如果是转化的原因的话 转化过程有什么要注意的吗 本人使用的最常用的SP和GM转化法 3.之前看到有其他朋友提到过枯草很容易产生假阳性 这个要怎么去判断呢 有什么培养的技巧吗 暂时就这些问题 希望大家可以帮我分析分析 如果有朋友是做这个方面的 有其他经验也可以在这里详细交流一下，谢谢大家了 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有261人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
月龙华光
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1287.6
- 散金: 266
- 红花: 1
- 沙发: 2
- 帖子: 403
- 在线: 54.3小时
- 虫号: 2557326
- 注册: 2013-07-21
- 专业: 肿瘤免疫
2楼2017-11-06 10:54:55
jxWire
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 21.6
- 散金: 28
- 帖子: 33
- 在线: 8.2小时
- 虫号: 3847323
- 注册: 2015-05-04
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2017-11-06 11:38:04
月龙华光
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1287.6
- 散金: 266
- 红花: 1
- 沙发: 2
- 帖子: 403
- 在线: 54.3小时
- 虫号: 2557326
- 注册: 2013-07-21
- 专业: 肿瘤免疫
4楼2017-11-08 10:26:21
jxWire
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 21.6
- 散金: 28
- 帖子: 33
- 在线: 8.2小时
- 虫号: 3847323
- 注册: 2015-05-04
- 专业: 微生物生理与生物化学
5楼2017-11-08 10:35:58
6楼2019-03-29 00:04:06
7楼2022-04-23 22:26:43
