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家乡宝大娟儿

新虫 (初入文坛)

[求助] 脂多糖配制已有1人参与

请问下各位大神是怎么配脂多糖的,我买了sigma公司的10mg打算做raw cell炎症模型,但是不知道该怎么配,用什么溶,需不需要过滤,配了之后怎么保存,可以保存多久?在此谢过了

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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2017-07-16 23:19:23
1、LPS可溶于水中(5 mg/ml),或是细胞培养基中(1 mg/ml)。LPS分子在任何溶液中都会形成微粒。溶于水中或是磷酸盐缓冲液中形成混悬液。在有机溶剂也是一种混悬液。
2、细胞培养时,将LPS溶于装有1 ml无菌平衡盐溶液或是细胞培养基的小管中,轻轻摇晃直至其完全溶解。再加入无菌平衡盐溶液或是培养基直至配成工作浓度的母液。
3、1 mg/ml浓度的溶液可在2-8℃中稳定保存1月左右,分装后于-20℃中可保存2年。反复冻融可致溶液不稳定。溶液应保存在硅烷化的器皿中,因为LPS易与塑料或是玻璃结合,特别在浓度<0.1 mg/ml时。如果LPS的浓度>1 mg/ml,那么器皿壁上结合的药物可以忽略不计。如果使用玻璃器皿,那么应使溶液涡旋至少30分钟以使溶液重悬。
4、由上面可知,LPS可直接配制到无菌的缓冲液中,无须过滤。因为是混悬液,所以使用之前应使之充分重悬。
及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-07-16 16:06:59
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昙惜baishe

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-16 16:06:59
1、LPS可溶于水中(5 mg/ml),或是细胞培养基中(1 mg/ml)。LPS分子在任何溶液中都会形成微粒。溶于水中或是磷酸盐缓冲液中形成混悬液。在有机溶剂也是一种混悬液。
2、细胞培养时,将LPS溶于装有1 ml无菌平衡盐溶液 ...

老师您好,我想问下,LPS产生絮状物是怎么回事呢?灭菌水稀释到1 mg/ml后,一直保存在4度冰箱,不知道为什么会有絮状物?是污染了吗?还是浓度问题析出絮状物了?求老师指教
3楼2017-11-16 15:05:29
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