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luxinying

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】sds电泳结果的BSA条带一直在70KD上面一点，跑了好几次都是同样的结果 已有1人参与

分离胶的浓度选的10%，marker买的生工的，中间那条紫色的是70KD，最上面一条是150KD，BSA分子量67KD，不知道为什么每次跑的结果都是在70KD上面一点啊

【求助】sds电泳结果的BSA条带一直在70KD上面一点，跑了好几次都是同样的结果
IMG_3381.JPG
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1楼 2017-07-15 15:03:20
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2017-07-15 23:31:30
1、你可以适当增加电压和延长跑胶的时间试试。
凝胶电泳分析只能定性，不一定非常准确，尤其是条带的大小判断，主要还是要测序才能检验结果。

2、如果测序、酶切鉴定都没有问题，那就是你的这个蛋白的组成有很多酸性蛋白，故等电点是偏酸的，也就是说电泳的pH条件下是带负电，所以结合的SDS比较少，而SDS-PAGE蛋白泳动速度和SDS的量相关（说白了是和总的SDS电荷相关），所以其电泳跑得比较慢。一般而言等电点很明显偏酸或偏碱的话SDS-PAGE看到的分子量都不是太准。
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luxinying
及时行乐，人生不留遗憾！
2楼2017-07-15 16:17:01
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luxinying

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-15 16:17:01
1、你可以适当增加电压和延长跑胶的时间试试。
凝胶电泳分析只能定性，不一定非常准确，尤其是条带的大小判断，主要还是要测序才能检验结果。

2、如果测序、酶切鉴定都没有问题，那就是你的这个蛋白的组成有很多 ...

好的谢谢，我是浓缩胶100v跑，到分离胶的时候换200v跑，一共跑4个多小时

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3楼2017-07-15 16:27:54
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